高压蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法.

    第一种是工艺监测,又称程序监测.根据安装在灭菌器上的量器(压力表、温度表、计时表)、图表、指示针、报警器等,指示灭菌设备工作正常与否.此法能迅速指出灭菌器的故障,但不能确定待灭菌物品是否达到灭菌要求.此法作为常规监测方法,每次灭菌均应进行.. 

    第二种是化学指示监测.利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点,以判断是否达到灭菌所需参数.常用的有：

    自制测温管：将某些化学药物的晶体密封于小玻璃管内(长2cm,内径1～2mm)制成.常用试剂有苯甲酸(熔点121－123℃)等.灭菌时,当湿度上升至药物的熔点,管内的晶体即熔化,事后,虽冷却再凝固,其外形仍可与未熔化的晶体相区别,此法只能指示温度,不能指示热持续时间是否已达标,因此是最低标准.主要用于各物品包装的中心情况的监测.

    3M压力灭菌指示胶带：此胶带上印有斜形白色指示线条图案,是一种贴在待灭菌的无菌包外的特制变色胶纸.其粘贴面可牢固地封闭敷料包、金属盒或玻璃物品,在121℃经20分钟,130℃经4分钟后,胶带100％变色(条纹图案即显现黑色斜条).3M胶带既可用于物品包装表面情况的监测,又可用于对包装中心情况的监测,还可以代替别针,夹子或带子使用.

    第三种是生物指示剂监测.利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌,以测定热力灭菌的效果.菌种用嗜热脂肪杆菌,本菌芽胞对热的抗力较强,其热死亡时间与病原微生物中抗力最强的肉毒杆菌芽胞相似.生物指示剂有芽胞悬液、芽胞菌片以及菌片与培养基混装的指示管.检测时应使用标准试验包,每个包中心部位置生物指示剂2个,放在灭菌柜室的5个点,即上、中层的中央各一个点,下层的前、中、后各一个点.灭菌后,取出生物指示剂,接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,置55－60℃温箱中培养48小时至7天,观察最终结果.若培养后颜色未变,澄清透明,说明芽胞已被杀灭.达到了灭菌要求.若变为黄色混浊,说芽胞未被杀灭,灭菌失败.
图5－4  高压蒸汽灭菌指示带

图5－5  高压蒸汽灭菌化学指示卡 

[干热灭菌与湿热灭菌的比较] 
    干热与湿热灭菌虽然都是利用热的作用杀菌,但由于本身的性质与传导介质不同,所以其灭菌的特点亦不一样(表5－1).
表5－1 干热灭菌与湿热灭菌的比较

	干热	湿热
加热介质	空气	水和蒸汽
对物品影响	烤焦	濡湿（皮革损坏）
适用对象	金属 玻璃与其他不畏焦化物品	棉织品 水液等不畏湿热 物品
作用温度	高（160－400℃）	低（60－134℃）
作用时间	长（1－5小时）	短（4－60分钟）
杀菌能力	较差	较强

 

     湿热与干热各有特点,互相很难完全取代,但总的说来,湿热的消毒效果较干热好,所以使用也普遍.湿热较干热消毒效果好的原因有三;①蛋白质在含水多时易变性,含水量多,愈易凝固;②湿热穿透力强,传导快.③蒸汽具有潜热,当蒸汽与被灭菌的物品接触时,可凝结成水而放出潜热,使湿度迅速升高,加强灭菌效果. 

                                 2、国徽消毒灭菌 

    包括光照消毒和电离国徽.光消毒主要是利用紫外线照射,使菌体蛋白发生光解、变性,菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡.紫外线通过空气时,可使空气中的氧气电离产生臭氧,加强了杀菌作用.紫外线穿透性差,不能透过玻璃,尘埃,纸张和固体物质；透过空气能力较强,透过液体能力很弱.光照消毒对杆菌杀菌力强,对球菌较弱,对霉菌、酵母菌更弱.对生长期细菌敏感,对芽胞敏感性差.光照消毒因地区、季节、环境的影响,效果有所差异,当温度低于4℃,湿度超过50％时,杀菌能力减弱.因此,消毒时,必须提高温度,延长消毒时间,一般室温保持在10－25℃为宜.减少空气中的尘埃,直接照射物品,可提高消毒的效果. 

(1)日光曝晒法  

    日光由于其热、干燥和紫外线作用,具有一定的杀菌力,将物品放在直射日光下,曝晒6小时,定时翻动,使物体各面均受日光照射.此法多用于被褥、床垫、毛毯、书籍等物品的消毒. 

(2)紫外线灯管消毒法 

    紫外线因其光谱位于紫色可见光之外,故称紫外线.紫外线灯管是一种人工制造的低压汞石英灯管,管内注入压强0.4～0.6kPa的氩气和水银数滴,管子两端用钨丝作成螺旋状电极.通电后,氩气先电离,然后冲击水银电离,发放紫外线.经5－7分钟后受紫外线照射的空气,才能使氧气产生臭氧.因此消毒时间应从灯亮5－7分钟后计时,紫外线杀菌能力与其波长有密切关系.最佳杀菌波长为2537nm(是细菌对紫外线吸收最快的波长). 

    常用的紫外线灯管有15W、20W、30W、40W四种,可采用悬吊式,移动式灯架照射,或紫外线消毒箱内照射.紫外线灯配用抛光铝板作反向罩,可增强消毒效果. 

    用于物品消毒时,如选用30W紫外线灯管,有效照射距离为25－60cm,时间为25－30分钟(物品要摊开或挂起,扩大照射面). 

    用空气消毒时,室内每10m2 安装30W紫外线灯管1支,有效距离不超过2m.照射时间为30－60分钟,照射前清扫尘埃,照射时关闭门窗,停止人员走动.  

    注意事项：

①注意眼睛、皮肤的保护,照射时嘱病人勿直视紫外线光源,可戴墨镜,或有用纱布遮盖双眼.用被单遮盖肢体,以免引起眼炎或皮肤红斑.

②紫外线灯管要保持清洁透亮.灯管要轻拿轻放.关灯后应间隔3－4分钟后才能再次开启.一次可连续使用4小时.

③定期监测消毒效果.紫外线的杀菌力取决于紫外线输出量的大小,灯管的输出强度随使用时间的增加而减弱.故日常消毒多采用紫外线强度计或化学指示卡进行监测,新管(30W)不低于100μW／cm2  

；使用中的旧管在50-70μW／cm2 ,则需延长消毒时间；低于50μW／cm2  

者必须更换.定期进行空气细菌培养,以检查杀菌效果. 

(3)臭氧灭菌灯(电子灭菌灯)消毒法 

    灭菌灯内装有1-4支臭氧发生管,在电场作用下,将空气中的氧气转换成高纯臭氧.臭氧主要依靠其强大的氧化作用而杀菌.使用灭菌灯时,关闭门窗,确保消毒效果.用于空气消毒时,人员须离开现场,消毒结束后20-30分钟方可进入. 

(4)电离辐射灭菌法 

    应用放射性同位素r源或直线加速器发生的高能量电子束进行灭菌.适用于忌热物品的常温灭菌方法.又称“冷灭菌”.尤其对一次性应用的医疗器材、密封包装后需长期储存的器材、精密医疗器材和仪器,以及移植和埋植的组织和人工器官,节育用品等特别适用. 

3、空气净化  

    空气本身缺乏细菌维持生活所需的营养物,再加上日光对细菌的影响,故空气中细菌很少.但如果室内光照和通风较差,同时微生物不断地从室内人群的呼吸道、皮肤排出,以及室内物品表面的浮游菌.使室内空气中细菌比室外多.利用通风或空气过滤器可使室内空气中的细菌、尘埃大降低,达到净化目的.  

(1)自然通风  

    定时开放门窗,以通风换气,这样可降低室内空气含菌的密度,短时间内使大气中的新鲜空气替换室内的污浊空气.通风是目前最简便、行之有效的净化空气的方法.通风的时间可根据湿度和空气流通条件而定.夏季应经常开放门窗以通风换气；冬季可选择清晨和晚间开窗,每日通风换气两次,每次20－30分钟. 

(2)空气过滤除菌 

    是医院空气净化措施中采取的现代化设备.即使空气通过孔隙小于0.2μ的高效过滤器,利用物理阻留、静电吸附等原理除去介质中的微生物.通过过滤除菌使病室、手术室或无菌药物控制室内的空气达到绝对净化的目的. 

    凡在送风系统上装备高效空气过滤器的房间,称生物洁净室.适用于无菌护理室、无菌手术室等.空气净化的进展,为重大手术的开展和治疗大面积烧伤病人防止感染,提供了更加有利的条件.

4、超声波消毒法

    是利用频率在20－200kHz的声波作用下,使细菌细胞机械破裂和原生质迅速游离,达到消毒目的.如超声洗手器,用于手的消毒.超声洗涤机,用于注射器的清洁和初步的消毒处理. 

(二)化学消毒灭菌法 

    利用化学药物渗透细菌的体内,使菌体蛋白凝固变性,干忧细菌酶的活性,抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构,改变其渗透性,破坏其生理功能等,从而起到消毒灭菌作用.所用的药物称化学消毒剂.有的药物杀灭微生物的能力较强,可以达到灭菌,又称为灭菌剂. 

    凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品,如锐利的金属、刀、剪、缝针和光学仪器(胃镜、膀胱镜等)及皮肤、粘膜,病人的分泌物、排泄物、病室空气等均可采用此法. 

1、化学消毒灭菌剂的使用原则 

(1)根据物品的性能及病原体的特性,选择合适的消毒剂. 

(2)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间和使用方法. 

(3)需消毒的物品应洗净擦干,浸泡时打开轴节,将物品浸没于溶液里. 

(4)消毒剂应定期更换,挥发剂应加盖并定期测定比重,及时调整浓度. 

(5)浸泡过的物品,使用前需用无菌等渗盐水冲洗,以免消毒剂刺激人体组织. 

2、常用化学消毒灭菌方法 

(1)浸泡法 

    选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂,将物品浸没于消毒剂内,在标准的浓度和时间内,达到消毒灭菌目的. 

(2)擦拭法 

    选用易溶于水、穿透性强的消毒剂,擦拭物品表面,在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的. (3)薰蒸法 

    加热或加入氧化剂,使消毒剂呈气体,在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的. 

    适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品(血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等),均可用此法消毒. 

①纯乳酸 常用于手术室和病室空气消毒.每100m2空间用乳酸12ml加等量水,放入治疗碗内,密闭门窗,加热熏蒸,待蒸发完毕,移去热源,继续封闭2小时,随后开窗通风换气. 

②食醋 5－10ml/m3加热水1－2m3,闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止.因食醋含5％醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用,对流感、流脑病室的空气可进行消毒. 

此外,尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌(详见表5－2). 

(4)喷雾法  

    借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器,使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间,进行空气和物品表面的消毒.如用1％漂白粉澄清液或0.2％过氧乙酸溶液作空气喷雾.对细菌芽胞污染的表面,每立方米喷雾2％过氧乙酸溶液8ml经30分钟(在18℃以上的室温下),可达99.9%杀灭率. 

(5)环氧乙烷气体密闭消毒法  

    将环氧乙烷气体置于密闭容器内,在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的. 

环氧乙烷是广谱气体杀菌剂,能杀灭细菌繁殖体及芽胞,以及真菌和病毒等.穿透力强,对大多数物品无损害,消毒后可迅速挥发,特别适用于不耐高热和温热的物品,如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等,均无损害和腐蚀等副作用.本品沸点为10.8℃,  

只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中. 

    操作方法：灭菌可用柜室法或丁基橡胶袋法. 

①柜室法  

    可在环氧乙烷灭菌柜内进行.将物品放入柜室内,关闭柜门,预温加热至40－60℃,抽真空至21kPa左右,通入环氧乙烷,用量1kg/m3,在最适相对温度(60－80％)情况下作用6－12小时.灭菌完毕后排气打开柜门,取出物品. 

②丁基橡胶袋法  

    在特制的袋内进行.将物品放入袋内,挤出空气,扎紧袋口.环氧乙烷给药可事先放安瓿于袋内,扎紧袋口后打碎,使其气体扩散；亦可将钢瓶放在40－50℃温水中气化后与袋底部胶管相通,使气体迅速进入,用药量为2.5g/L.将橡胶袋底部通气口关闭,放入20－30℃室温中放置8－24小时.
注意事项: 
①环氧乙烷应存放在阴凉、通风、无火源、无电开关处.用时轻取轻放,勿猛烈碰撞.
②消毒时,应注意环境的相对湿度和温度.钢瓶需加温时,热水不可超过70℃.
③消毒容器不能漏气(检测有无漏气,可用浸有硫代硫酸钠指示剂的滤纸片贴于可疑部位.如有漏气,滤纸片由白色变粉红色).袋内物品放置不宜过紧.
④环氧乙烷有一定吸附作用,消毒后的物品,应放置在通风环境,待气体散发后再使用.
⑤本品液体对皮肤、眼及粘膜刺激性强,如有接触,立即用水冲洗.
⑥在环氧乙烷消毒的操作过程中,如有头昏头痛等中毒症状时,应立即离开现场,至通风良好处休息. 
3、消毒剂的性质与消毒水平 
(1)高水平消毒剂 杀菌谱广、消毒方法多样,如环氧乙烷、过氧乙酸、甲醛、戊二醛、含氯消毒剂(漂白粉、三合一、次氯酸钠、优氯净等).高水平消毒剂性质不稳定,需现用现配. 
(2)中等水平消毒剂 其特点是溶解度好、性质稳定、能长期贮存,但不能作灭菌剂.如碘伏、碘酒、乙醇、煤酚皂、高锰酸钾等. 
(3)低水平消毒剂 性质稳定、能长期贮存,无异味,无刺激性,但杀菌谱窄,对芽胞只有抑制作用.如季胺盐类(新洁尔灭、杜米芬、消毒净)、洗必太等. 
4、消毒剂浓度稀释配制计算法 
    消毒剂原液和加工剂型一般浓度较高,在实际应用中,必须根据消毒的对象和目的加稀释,配制成适宜浓度使用,才能收到良好的消毒灭菌效果.

 

 

消毒剂名称	消毒水平	作用原理	使用范围	注意点
乙醇  Alcohol	中效	使菌体蛋白凝固变性,但对肝炎病毒及芽胞无效	1.以70％－75％溶液作为消毒剂,多用于消毒皮肤  2.95％溶液可用于燃烧灭菌	1.易挥发需加盖保存并定期调整其浓度 低于70％浓度则消毒作用差  2.因有刺激性,不宜用于粘膜及创面的消毒
碘 酊  Tr.lodine	高效	使细菌蛋白氧化  变性能杀灭大部分细菌,真菌芽胞和原虫	1. 2％溶液用于皮肤消毒,擦后20S再用75％乙醇脱碘  2. 2.5％溶液用于脐带断端的消毒,擦后20s,再用75％乙醇脱碘	1.对皮肤有较强的刺激作用,高浓度不能用。更不能用于粘膜消毒,如会阴肛门,阴囊,眼,口鼻部手术消毒以免引起灼伤  2 .皮肤过敏者禁用
苯扎溴铵  （新洁尔灭）Bromo-geraminum	低效	是阳离子表面活性剂,能吸附带阴电的细菌,破坏细菌的细胞膜,最终导致菌体自溶死亡,又可使菌体蛋白变性而沉淀	1. 0.01％－0.05％溶液用于粘膜消毒  2. 0.1%-0.2%溶液用于皮肤消毒 3. 0.1%-0.2%溶液用于消毒金属器械,浸泡15－30min(加入0.5％亚硝酸钠以防锈)	1. 对肥皂,碘,高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用 2 .有吸附作用,会降低药效,所以溶液内不可投入纱布,棉花等
苯扎溴铵酊  （新洁尔灭） Tin.Bromogeraminum	中效	同上	用于皮肤粘膜消毒	取苯扎溴铵（新洁尔灭）lg＋曙红0.4g+95%乙醇700ml＋蒸馏水至1000ml
洗必太  Hibitane	低效	具有广谱抑菌杀菌作用	1. 0.02％溶液用于手的消毒浸泡3min  2. 0.05％溶液用于创面消毒  3. 0.1％溶液用于物体表面的消毒	同苯扎溴铵（新洁尔灭）
福尔马林  Formalin (37％－40％)的甲醛溶液	高效	菌体蛋白变性  酶活性消失.能杀灭细菌,真菌,芽胞和病毒	1. 空气消毒加热法:取福尔马林12.5ml/m3 加入等量水,加热蒸发成气雾,待药蒸发完毕断绝热源,继续封闭6h以上。  2 .熏柜消毒加热法,取福尔马林40－80ml/m3 柜内置电灯泡,通电加热,密封熏蒸3－24h。 3.氧化法 取福尔马林10ml+高锰酸钾5g/m3密封熏蒸6 h 以上	熏蒸穿透力弱,衣服最好挂起消毒
环氧乙烷  Ethylene  Oxide	高效	与菌体蛋白结合,使酶代谢受阻而导致死亡  能杀灭细菌 真菌 病毒 立克次体和芽胞	1. 用于电子仪器和不耐高温物品,如皮革,皮毛,化纤织物,一次性高分子医疗器材等的灭菌处理  2. 少量物品可装入塑料袋或丁基橡胶袋中消毒,大量物品则用环氧乙烷灭菌器加温密闭消毒.常用剂量为0.12%-0.8%,温度为20－37℃,时间为6－24h 3. 投药量为0.4-0.8kg/m3	1. 此药易燃易爆,且有一定毒性,必须熟悉使用方法,并严格遵守安全操作程序  2. 放置阴凉通风,无火源及电源开关处,严禁放入电冰箱 3. 贮存湿度不可超过40℃,以防爆炸 4. 灭菌后的物品,应清除环氧乙烷残留量后方可使用
过氧乙酸  Peracetic  Acid (P.A.A.)	高效	能产生新生态氧将菌体蛋白质氧化,使细菌死亡,能杀灭细菌,真菌, 芽胞,病菌	1. 0.2％溶液用于手的消毒浸泡1－2min  2 .0.2％-0.5％溶液用于物体表面的擦拭或浸泡10min 3. 0.5％溶液用于餐具消毒 浸泡30－60min 4. 1％－2％溶液用于室内空气消毒	1. 浓溶液有刺激性及腐蚀性 配制时要戴口罩和橡胶手套须谨慎防止溅到它处  2. 因腐蚀性强不宜用金属器皿盛装  3. 存于阴处，防高温引起爆炸  4. 易氧化分解可降低浓度和杀菌力 故须现配现用
漂白粉  Chloriole of lime	中高效	在水溶液中放出有效氯,破坏细菌酶的活性而致死亡.能杀灭各种致病菌 病毒芽胞	1. 0.5％漂白粉澄清液用于餐具消毒,浸泡30min  2. 1％－2％澄清液用于肝炎患者的餐具消毒,浸泡1－2h 3. 1％－3％澄清液喷洒（100－300ml/m3）消毒30min后通风或擦拭病室物品及厕所 4.干粪5份加漂白粉1份搅拦,放置2h,尿液100ml加入漂白粉1g放置1h	1. 配制的澄清液性质不稳定,密封保存时间不可超过1周  2 .有腐蚀及退色作用 不宜用于金属制品 有色衣物及油漆家具 布类消毒后应立即清洗 以防被腐蚀
戊二醛  Gluaraldchyde	高效	与菌体蛋白质反应,使之灭活能杀灭细菌真菌病毒和芽胞	1. 2％溶液用于各种内窥镜消毒,浸泡1h  2. 2%溶液用于不耐热手术器械 导管注射器 口镜 口腔科器械,透析器械消毒,浸泡10h	1.消毒后的物品于使用前用无菌生理盐水冲洗  2. 内窥镜连续使用需间隔消毒10min, 每天使用前后各消毒30min消毒后用冷开水冲洗 3 每周过滤1次每2－3周更换消毒剂1次
碘伏  （达尔美净化剂） PVP－I	中高效	是碘与表面活性剂的不定型结合物能杀灭细菌芽胞.还有清洁作用	1. 3％溶液用于体温计消毒浸泡30min  2. 0.5%-1%碘伏液用于手术前皮肤消毒和手消毒	1. 体温计消毒前将唾液揩净 浸泡30 min后,用冷开水洗净揩干使用  2. 皮肤消毒后留有色素可用水洗清
过氧化氢  （双氧水） Hydrogen preoxide	高效	过氧化氢能破坏蛋白质的基础分子结构从而具有抑菌与杀菌作用	1. 3％－6％溶液用于烯酸树脂制成的外科体内埋植物的消毒  2. 10％－25％溶液用于不耐热的塑料制品消毒	1. 使用前用无菌生理盐水冲洗  2. 易氧化分解 降低浓度应存于阴凉处不宜用金属器皿盛装
消毒灵	高效	同漂白粉	1. 0.5％溶液用于针筒 针头 输液 输血器的消毒浸泡1h  2. 1％溶液用于胃管肛管导尿管等消毒,浸泡1h 3. 1％溶液用于体温计消毒,第一次浸泡5min第二次浸泡30min	消毒后物品，使用前需用无菌生理盐水冲洗

 

注:高效,可杀灭一切微生物. 
   中效,可杀灭细菌繁殖体、结核杆菌、病毒、不能杀灭芽胞. 
   低效,可杀灭细菌繁殖体、真菌，不能杀灭芽孢和病毒. 
附:几种常用去污渍法 
（1）陈旧血渍:浸入过氧化氢溶液中,然后洗净. 
（2）龙胆紫污渍酒精或草酸擦拭. 
（3）凡士林或石蜡油污渍:将污渍折夹在吸水纸中,然后用熨斗熨烙以吸污. 
（4）墨水污渍:新鲜污渍用肥皂、清水洗、不能洗净时再用稀盐酸或草酸溶液洗.也可用氨水或双氧水褪色. 
（5）铁锈污渍:浸入1％热草酸后用清水洗,也可用热醋酸浸洗. 
（6）蛋白银污渍:可用盐酸及氨水擦洗. 
（7）高锰酸钾污渍:可用1％维生素C溶液洗涤,或0.2%～0.5%过氧乙酸水溶液浸泡清洗.