长期以来产气荚膜梭菌一直仅被认为是一种创伤感染病原菌,直到1943年,才证实它可经过消化道对人产生危害,为食物中毒病原菌。作为重要的病原菌,在食品及水的微生物检验标准中均有涉及,如GB 4789.13-2012、GB 8538-2016,在微生物实验室产气荚膜梭菌检验实验过程中,应注意以下四点:
1、分离本菌采用TSC琼脂(GB 4789.13-2012),添加样品并倾注培养基后,需注意在培养基凝固后在表面再倾注一层培养基,使得样品完全被培养基覆盖。若产气荚膜梭菌暴露在外界,则可能导致其菌落不显黑色。
产气荚膜梭菌ATCC13124
2、进行暴烈牛乳发酵实验时,含铁牛乳培养基只煮沸溶解不灭菌的话,能有效提前暴烈发酵的时间。此外,接种菌液时,菌液浓度需较高,并且接种于培养基中下部,不能接种于培养基表面;因暴烈发酵时培养基会上升,因此培养及表面到试管口应留一定空隙,防止实验过程中培养基溢出。
图左为灭菌培养基,右图为未灭菌培养基
3、乳糖明胶在温度较高之时呈现液态,此时接种接种FTG培养物至乳糖明胶生化管当中即可。记得是在培养结束后将乳糖明胶放置4度1小时,再观察培养基的液化情况,而不是在培养基结束后立刻观察。
阳性 阴性
4、缓冲动力硝酸盐实验,滴加硝酸盐试剂甲、乙液以检查亚硝酸盐的存在。15 min内出现红色者,表明硝酸盐被还原为亚硝酸盐;如果不出现颜色变化,则加少许锌粉,放置10 min,出现红色者,表明该菌株不能还原硝酸盐。如果没有出现颜色,说明原菌已经将硝酸盐还原至氮气甚至铵盐。
产气荚膜梭菌ATCC13124