一、染色注意事项

1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的处理是不一样的。 

2．染色过程中所用的时间要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。 

3．伊红有水溶的和醇溶的，如果用的是水溶的，应该在脱水前进行染色，如果是醇溶的，应使用与溶解伊红等浓度的酒精开始脱水。 

4．在二甲苯脱蜡之前可以先在60℃烤箱内0.5~1小时，这样可以使切片粘附更牢固不易脱片，也有利于脱蜡。 

5．二甲苯在HE染色中有脱蜡、透明的作用。二甲苯脱蜡的好坏主要取决于切片在二甲苯内放置的时间和脱蜡时的温度以及二甲苯的使用次数。染好的切片必须经过透明，有利于显微镜观察，同时并为封片起到了桥梁作用。 

6．用梯度酒精脱水时，在低浓度酒精中时间不宜过长，到高浓度时逐步延长脱水时间。以免脱水不彻底，影响二甲苯透明的效果。 

7．在酸性分化液内停留的时间不要过长，分化不可过度，避免使细胞核内该染上色的结构脱色。不需分化处理的苏木精染色时要注意掌握染色时间，以防止组织切片染色背景过深或细胞核、胞质染色不足。
二、取材注意事项

1）取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。

2）切片材料应根据需要观察的部位进行选择，尽可能不要损伤所需要的部分。 
三、固定注意事项

（1）一般固定液，都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，以免引起化学变化，失去固定作用。 

（2）有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早，固定时就没有作用了。 

（3）固定材料时，固定液必须充足，一般为材料块的20~30倍，有些水分多的材料，中间应更换1-2次新液。 

（4）材料固定完毕后，保存于严密紧塞或加盖的容器里，同时在容器外上标签，并随同材料在溶液中投入相应的标签，以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字，应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。 

四、 脱水注意事项

（1）脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收空气中的水分和酒精挥发。 

（2）在更换高一级的脱水剂时，最好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水器吸尽皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。 

（3）在低浓度酒精中，每级停留不宜太长，否则易使组织变软，助长材料的解体。 

（4）在高浓度或纯酒精中，每级停留的时间也不宜太长，否则会使组织变脆，影响切片。 

（5）如需过夜，应停留在75%酒精中。 

（6）脱水必须彻底，否则不易透明，甚至使透明剂内出现白色混浊现象。
五、透明注意事项

（1）使用透明剂时，要随时盖紧盖子，以免空气中的水分进入和透明剂的挥发。 

（2）更换每级透明剂，动作要迅速，一方面为了不使材料块干涸，另一方面能避免吸收湿气。 

（3）在透明过程中，如果材料周围出现白色雾状，说明材料中的水未被脱净，应退回纯酒精中重新脱水，然后再透明。
六、透蜡注意事项  

（1）尽量保持在较低温度中进行，以石蜡不凝固为度。

（2）透蜡温度要恒定，不可忽高忽低。 

（3）操作要迅速，力求在最短的时间内完成石蜡透入过程，以免引起组织变硬、变脆、收缩等。