答：每个制备批次的培养基都应测定pH，可采用pH试纸或pH计测量。

2.含琼脂培养基冷却至25℃后已凝固，如何测定其pH？

答：有专门的固体培养基pH计，如Radiometer A/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。

3. 稀释液灭菌后pH值是否有变化？有何影响？（如pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液，pH6.8无菌磷酸盐缓冲液） 

答：一般pH有下降现象，约0.2左右，不同培养基pH变化可能不同。 

4. 孟加拉培养基是否可以取代玫瑰红钠琼脂进行培养霉菌和酵母菌？ 

答：根据中国药典，采用玫瑰红钠琼脂。

5. 配制pH值7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液时有时因为高压灭菌器灭菌过程温度过高而导致培养基混浊了，这种情况缓冲液还能用吗？ 

答：建议按正常温度灭菌，混浊培养基建议不要使用。

6.含琼脂培养基在冷藏中形成冰晶怎么处理？销毁还是加热再用？

答：建议不要使用。

7.融化的培养基为什么不能再冷水中冷却？ 

答：防止受热不均引起结块。 

8. 灭菌后，灭菌锅需自然冷却降压才可以打开，这段时间是否会造成过度灭菌。

答：自然冷却过程已经计算在正常灭菌时间内了，不会造成过度灭菌。 

9. 培养基所用器具若使用湿热灭菌，是否必须待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中间过程怎样防止微生物污染？ 

答：如果是马上使用且不是用于非水溶性供试液的制备及实验，不一定要烘干；否则，应干燥后使用，灭菌及干燥尽量在同一锅里进行，或用纱布和牛皮纸包扎紧密。

10. 培养基的避光储存，是否配置好的培养基其全部放避光储存？ 

答：最好都避光保存。无条件时，光敏感的培养基一定要。 

11. 商品培养基干粉说是加蒸馏水溶解，实际操作是否可以用纯化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影响微生物生长的物质的水均可。

12. 培养基及器具灭菌可否同一设备同灭菌时间进行灭菌？

答：最好分开灭菌，条件不允许时可同炉灭菌，前提是都是洁净无污染的。

13. 培养基的保温能否用60℃的培养箱，它与45℃-55℃水浴锅保温方法有何不同？ 

答：可以用恒温培养箱保温，但保温温度一般是50℃左右，且时间不能过长，一般是不超过4小时。

14. 培养基的贮存是否需要放置于2-10℃冰箱内？ 

答：需冷藏保存的培养基外包装上会写明。

15. 培养基灭菌后成份会有所蒸发减少，如何处理这个问题？

答：正常情况下蒸发量较少，可忽略不计。

16. 培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的？应如何避免？ 

答：可能的情况有:

1. 培养基配置用水不符合规定；

2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢；

3. 培养基储存不当；

4.融化时沸腾时间较长等。

17. 准备好的培养基有效期如何验证？ 

答：定期取出培养基验证其无菌性，促生长能力等方面。

18. 培养基配制好灭菌后，在高压容器中保温降至50℃左右，可不可行？ 

答：建议最好不要，避免过度受热。 

19. 脱水培养基对湿度是否有要求？多少适宜？ 

答：按要求室温干燥环境储存即可。 

20. 培养基pH值测定温度在25℃，这个温度应怎么控制？比如固体培养基，固体培养基使用过程中还能调节pH值吗？ 

答：可水浴控制培养基温度。

21. 配制培养基过程中，按说明书称定量，加规定的纯化水，煮沸溶解，为了避免煮沸过程总减少水分，是否要在配制过程适当增加水?比如陪硫乙醇酸盐流体培养基. 

答：可适量增加，自己掌握。

22. 商品培养基一定要当天配当天用吗？可否在一周内用完？ 

答：不是即配即用的培养基的话，储存的当，可以使用。

23. 称量培养基时，注意不要吸入粉末，这粉末是指何物？ 

答：就是你所称量的干粉培养基 ，因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用，而且培养基中的某些成分，如亚硒酸盐、叠氮化钠、乙酰胺等，长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护，且最好选择少粉尘环保型颗粒培养基。

24. 煮培养基，用不锈钢锅在电磁炉上煮可行？硫乙醇培养基是否要煮沸？如何煮沸？用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗？可不可以水浴煮沸呢？ 

答：硫乙醇应煮沸，量大时，我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸，因为水浴煮沸琼脂粉很难溶，导致琼脂分装不均匀，前段分装的琼脂含量少，后段分装的琼脂含量高，导致有的管或瓶中的FT凝固。

25. 如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗？ 

答：高温灭菌器有安全阀，温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却，各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。

26.平板涂布和平板划线培养基表面水分过多，菌落蔓延如何解决？

答：对于采用表面接种形式培养的固体培养基，应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿盖，将平板倒扣于烘箱或培养箱中（温度设为25℃～50℃）；或放在有对流的无菌净化台中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。