1.细菌在营养琼脂平板上的生长现象
细菌经一定时间培养后,在固体培养基表面所形成的,肉眼可见的物体(群落),称为菌落。
一个单一的菌落原则上是由一株细菌生长繁殖而成,其特征代表了该菌种细菌的特性。
观察的方法是将平皿培养物放在自然光或白炽灯光的前面,从不同角度进行观察。
菌落形状:圆形、不整形、扁平、凸起、凹面
菌落大小:以mm计算。
表面性状:光滑、粗糙、有无光泽等。
边缘情况:整齐、不整齐、锯齿状等。
颜 色:无色、白色、黄色、灰色等。
透 明 度:不透明、透明、半透明等。
质 地:硬、软、脂状、磨状等。
粘 度:奶油状、黏液状、膜状易碎等。
乳 化 性:指在生理盐水中,将一菌落在盐水中研磨形成均匀乳状或颗粒状的程度。
菌落形态学(Bacterial Colony Morphology)
有荚膜的细菌菌落较大并且表面光滑,而没有荚膜的则表面较粗糙;
具有芽孢的细菌菌落表面常有褶皱并且不透明。
没有鞭毛不运动的细菌,特别是球菌,常形成较小、较厚、边缘较整齐的菌落;有鞭毛的细菌则较大而扁平,边缘波状、锯齿状等;
光滑型菌落
粘液型菌落
粗糙型菌落
单增李斯特氏菌在普通计数琼脂平板上的菌落
2.细菌在鉴定培养基上的特征
(1)在血平板上的溶血特征
α溶血:在菌落周围出现狭窄的草绿色的半透明区域,而红细胞外形完整。
β溶血:在菌落周围出现一个大小不一的完全透明清楚的宽带。
γ溶血:看不到溶血带的溶血。
双环:菌落周围完全溶解的晕圈外有一部分溶血的圆圈。
(2)卵黄琼脂中的反应:
此培养基用于检查细菌是否产生卵磷脂酶和脂酶,前者是在菌落周围出现一沉淀环,后者则是出现“珍珠包膜”,即在菌落周围出现“珍珠层”,通过反射光可见菌落周围有一层闪光膜。
乳糖卵黄琼脂平板,借以确定该菌可否产生卵磷脂酶。卵磷脂酶具抗原性,其活性可被相应抗血清所抑制,
(3)蛋白水解作用:在菌落周围出现清晰的环。
(4)色素:细菌在生长过程中可产生色素。
水溶性色素溶在培养基中,使培养基着色,如绿脓色素、荧光色素等;
脂溶性色素则使细菌菌落着上颜色,如金黄色葡萄球菌的金黄色菌落。
(5)气味:有些细菌在生长过程中可产生气味,有助于细菌的鉴定。
能产生特殊气味的细菌有:假单胞菌属细菌可产生葡萄汁气味;变形杆菌产生巧克力烧焦的臭味;链球菌产生地窖里的霉臭;梭菌可产生粪臭、腐败味;产黑色素类杆菌属细菌产生辛辣味等。
(二)细菌在液体培养基中的生长现象
细菌在液体培养基中一般以培养18~24h,观察生长特性为好。细菌在液体中生长特性包括:
1.发育程度 以有无生长,微弱、中等、旺盛来表示。
2.浑浊度 有无浑浊以及浑浊的程度(一般以混、中等、微浑、透明表示);均匀浑浊、有颗粒;絮状生长。
3.沉淀 细菌由于重力而下沉,如链球菌的链与链相互缠绕而下沉,出现肉眼可见的沉淀,而上层的液体仍清澈透明,或者由于发酵分解糖产生酸,而使基质中的蛋白质发生沉淀。
4.液体表面性状 有无表面生长以及生长的性状,如膜状(厚薄)、环状、皱状、是否光滑或呈颗粒状。
5.其他 有无色素,有无气味,有无产酸情况,有无气体产生。
(三)细菌在半固体培养基中的生长现象
半固体培养基主要用于细菌动力的观察:
有动力的细菌在穿刺线处有生长线外,在穿刺线的周围均可见浑浊和细菌生长的小菌落;
无动力的细菌仅在穿刺线上有生长,周围的培养基透明清晰。