培养基的主要作用有两方面:
①提供微生物生长所需的营养物质;
②培养基具有选择性和差异性,可以选择特定类型的细菌或真菌进行培养,并区分不同种类的微生物。
因此,在微生物检验中,必须对培养基进行严格的质量控制,只有优质的培养基才能为微生物检验提供精准、可靠的检测结果。
培养基的概述
培养基是用于保证微生物繁殖、鉴定、保持活力的物质,按照物理性质可以分成液体培养基、固体培养基、半固体培养基和脱水培养基,按照化学性质可以分成天然培养基、组合培养基和半组合培养基,按照功能可以分成选择性培养基、鉴别培养基。不同培养基要求不同,保存方式也不同。在受热、吸潮后,培养基极易被微生物污染或分解变质,需在避光、防潮、阴凉处储存。
培养基的采购验收
微生物检验需使用大量培养基。为提高检验效率,实验室多使用商品化即用型培养基、商品化脱水合成培养基。在培养基的采购中,应选择国内、外知名商家的产品,并向生产企业索要培养基成分名称、产品编号、批号、最终 pH 值、储存条件、生产日期、有效期、质控报告和必要的相关信息,以保证培养基的质量。在产品交货验收时,购买者需对产品包装的完整性、生产日期、有效期和产品合格证明等进行核验,检查培养基的颜色、性质等是否符合实验室相关标准,培养基检验合格后进行入库登记。
培养基的制备
配制要求
正确按要求制备培养基是做好微生物检验的基础。实验人员使用商品化脱水合成培养基配制培养基时,要严格按照产品说明进行配制,并做好配制记录。在配制过程中,实验人员需要严格遵守相关操作标准,佩戴口罩进行操作,避免吸入含有有毒物质的培养基粉末,称量、溶解应使用专门的角匙,不使用金属制品,避免金属离子混入培养基,影响微生物生长;准确称量后,应先加入适量的水充分溶解,再加水至所需量进行加热,加热中应不断搅拌,防止培养基在容器底部积聚;调节pH值,分装到比培养基体积最少大 20% 的容器中,按说明要求进行灭菌。粉末状态的培养基开封后应存放在阴凉干燥处,及时使用,环境湿度过大会使培养基出现受潮、结块、污染等情况。对于琼脂类培养基,可采用沸水浴或流动蒸汽的加热方式进行融化,但反复冻融只允许进行1次。
配制用水
水是配制培养基不可或缺的一部分,一般使用纯化水。还应定期检查培养基配制用水的微生物污染情况,应符合纯化水要求。