微生物菌种保藏是确保菌种长期稳定性和活性的关键步骤。保藏方法的选择取决于菌种的特性和保藏目的。常用的保藏方法包括短期保藏法(如冰箱保藏和琼脂斜面培养)和中长期保藏法(如冻干保藏和液氮冷冻)。此外,还有特殊保藏方法,如玻璃化保藏,适用于特定菌种的长期保藏。
1)短期保藏法
-
冰箱保藏:将菌种保存在4°C的冰箱中,适用于短期保藏。
-
琼脂斜面培养:将菌种接种在琼脂斜面上,保存在冰箱中,适合数月至一年的保藏。此方法适用于细菌、酵母菌、霉菌等,但由于可能导致菌种活力逐渐下降,需要定期转接更新。
2)中长期保藏法
-
冻干保藏:通过冻干技术(在预冷和真空条件下,将微生物与保护剂混合后快速冷冻,接着通过升华去除水分,是微生物进入休眠状态。)将菌种脱水后保存,可以实现长期保藏。
-
液氮冷冻:将菌种悬浮于含保护剂的溶液中,然后迅速投入液氮或液氮蒸汽中保藏。
3)特殊保藏方法
-
玻璃化保藏:通过快速冷冻形成玻璃态,防止冰晶形成损伤细胞,适合特殊菌种的长期保藏。
4)保藏过程中的注意事项
-
确保菌种的纯度,避免污染。
-
详细记录菌种的名称、来源、接种日期等信息,便于管理和追溯。
-
定期检测菌种的活性和纯度,确保菌种的稳定性。