之前收到网友的提问，想根据GB/T 4789.6-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》检测产品，但是发现2016版与2003版检测过程有所不同，对增加的PCR确认试验的部分有所疑问。
   
标准中“6.5 PCR确认试验”部分详细介绍了PCR实验的基本过程和耗材要求，主要步骤包括菌落挑取、核酸提取、PCR反应体系的配制、PCR循环条件、电泳、结果判定。
  对于经常做PCR的实验员来说，按照标准操作就可以了。但是对于没有做过PCR实验的小白，在拿到标准之后，应该如何准备试剂耗材？怎样进行实验呢？
  今天先来说一说4.28 Marker。
【原文】
   4.28 Marker:分子量包含 100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp、700bp、800bp、900bp、 1000bp、1500bp条带。
  实验小白心里想：哦莫！PCR实验这么复杂吗？光一个Marker试剂就要准备这么多？不是说PCR比传统的微生物培养好做吗？果断放弃……
Marker是啥？
  DNA Marker（也叫DNA Ladder）由特定分子量的双链DNA片段组成，已混有含蓝色染料的上样缓冲液，适用于琼脂糖凝胶电泳时作为DNA分子量标准。
这么说太官方了，换个说法，Marker就相当于一把尺子，是尺子就肯定有刻度，这个刻度就是不同大小的条带。
聪明的你应该也猜到了，其实标准中说的不同分子量的条带其实是在同一个Marker里的。当我们买回来一管Marker，这管Marker里就会有分子量不同的我们需要的条带。
  Marker有不同的规格，常见的有DL2000、DL5000、DL15000、100bp DNA Ladder等。Marker在电泳之后，最后结果观察时会呈现出如下图的条带。这些条带就是“尺子”上的“刻度”。
  Marker的价格也不贵，而且每次上样5μL就足够，1mL的Marker也可以够我们用很久很久了。
  便宜又好用，原来只需要准备1支就可以，是不是长舒一口气？
  只要尝试过PCR实验，它的简便快捷会超乎你想象!
  其实国外很多实验室早已经用PCR的方法进行微生物检测，不仅通量高、准确性还好，国内很多标准也早已使用PCR的方法进行检测，毕竟谁不喜欢简单又高效的检测方法呢？
  希望今天的分享会对您的实验有所帮助。

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