检测点
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检验项目 |
技 术 要 求 |
检验方法 |
采样方法 |
检测频率 |
判定
方案 |
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工器具、
案板等接触面
(生产现场) |
菌落
总数 |
≤5000个/25cm2 (生)
≤2500个/25cm2(熟) |
梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告 |
用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面,取25cm2的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检 |
1次/周/车间 |
一项不合格判为不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》执行 |
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大肠
菌群 |
≤30MPN/25cm2(生)
阴性(熟) |
试管法:梯度稀释,三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管,36±1℃,48h后记录产气管数,然后复发酵,记录产气管数,查MPN表报告 |
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员工手
(生产现场) |
菌落
总数 |
≤5000个/手(生)
≤2500个/手(熟) |
梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告 |
被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖到指端来回涂擦10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检 |
1次/周/车间 |
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大肠
菌群 |
≤90MPN/手(生)
阴性(熟) |
试管法:梯度稀释,三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管,36±1℃,48h后记录产气管数,然后复发酵,记录产气管数,查MPN表报告 |
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空
气 |
车间 |
菌落
总数 |
≤30个/皿 |
平板暴露法:车间在30m2以上者,于东、西、南、北(距墙1m处)、中五点;小于30m2者,于一条对角线里、中、外三点,高度均在1.5m处采样,打开平皿盖,使平板在空气中暴露30 min |
取样后的琼脂培养基于37℃温箱培养48h后观察结果,求出5个或3个采样点的平均菌数 |
2次/月/车间 |
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更衣室 |
菌落
总数 |
≤40个/皿 |
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生产用水 |
菌落
总数 |
≤100CFU/ml |
梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告 |
对待取样的水龙头进行消毒,并打开水龙头数分钟,用经过灭菌的玻璃采样瓶去水样0.5L后及时送检,采样后按照每125ml水样加入0.1mg硫代硫酸钠除去残留余氯。 |
1次/月,全年检测完所有水龙头 |
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大肠菌群 |
不得检出 |
多管发酵法: 1、乳糖发酵试验:接种5份10 mL水样双料培养基,每份接种10ml水样,将接种管置36℃ 士l℃ 培养箱内,培养24h士2h,如所有乳糖蛋白膝培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。 2、分离培养:将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,于36℃ 土1℃ 培养箱内培养18h—24h,观察菌落形态,挑取符合下列特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实试验。 3、证实试验:经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽抱杆菌,同时接种乳糖蛋白胨培养液,置36℃ 士1℃培养箱中培养24h士2h,有产酸产气者,即证实有总大肠菌群存在。 4、结果报告:查MPN ( most Probable number,最可能数)检索表,报告每l00ml水样中的总大肠菌群最可能数(MPN)值。稀释样品查表后所得结果应乘稀释倍数。如所有乳糖发酵管均阴性时,可报告总大肠菌群未检出 |