索氏抽提法

1范围

本法适用于水果、蔬菜及其制品、粮食及粮食制品、肉及肉制品、蛋及蛋制品、水产及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游离态脂肪含量的测定。

2原理

脂肪易溶于有机溶剂。试样直接用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸发除去溶剂，干燥,得到游离态脂肪的含量。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682-2008规定的三级水。

3.1 试剂

3.1.1无水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.2石油醚(C_nH_2n+2):沸程为30 ℃~60℃。

3.2 材料

3.2.1石英砂。

3.2.2脱脂棉。

4仪器和设备

4.1索氏抽提器。

4.2恒温水浴锅。

4.3分析天平:感量0.001 g和0.0001 g。

4.4电热鼓风干燥箱。

4.5干燥器:内装有效干燥剂，如硅胶。

4.6滤纸简。

4.7 蒸发皿。

5分析步骤

5.1试样处理

5.1.1固体试样 :称取充分混匀后的试样2 g~5 g，准确至0.001 g,全部移入滤纸简内。

5.1.2液体或半固体试样:称取混匀后的试样5g~10 g,准确至0.001 g,置于蒸发皿中,加入约20g石英砂。于沸水浴上蒸干后,在电热鼓风干燥箱中于100℃土5℃干燥30min后,取出,研细，全部移入滤纸简内。蒸发皿及粘有试样的玻璃棒,均用沾有乙醚的脱脂棉擦净,并将棉花放入滤纸简内。

5.2 抽提

将滤纸简放入索氏抽提器的抽提简内,连接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的三分之二处,于水浴上加热，使无水乙醚或石油醚不断回流抽提(6次/h~8次/h),一般抽提6 h~10 h。提取结束时,用磨砂玻璃棒接取1滴提取液,磨砂玻璃棒上无油斑表明提取完毕。

5.3 称量

取下接收瓶，回收无水乙醚或石油醚,待接收瓶内溶剂剩余1 mL~2 mL时在水浴上蒸干,再于100 ℃士5℃干燥1 h，放干燥器内冷却0.5 h后称量。重复以上操作直至恒重(直至两次称量的差不超过2 mg)。

6分析结果的表述

试样中脂肪的含量按式(1)计算:

式中:

X -试样中脂肪的含量,单位为克每百克(g/100 g)；

m₁-恒重后接收瓶和脂肪的含量,单位为克(g)；

m₀-接收瓶的质量,单位为克(g)；

m₂-试样的质量,单位为克(g)；

100-换算系数。

计算结果表示到小数点后-位。

7精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

酸水解法

1范围

本法适用于水果、蔬菜及其制品、粮食及粮食制品、肉及肉制品.蛋及蛋制品、水产及其制品、焙烤食品、糖果等食品中游离态脂肪及结合态脂肪总量的测定。

2原理

食品中的结合态脂肪必须用强酸使其游离出来,游离出的脂肪易溶于有机溶剂。试样经盐酸水解后用无水乙醚或石油醚提取,除去溶剂即得游离态和结合态脂肪的总含量。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682-2008规定的三级水。

3.1 试剂

3.1.1 盐酸(HC1)。

3.1.2 乙醇(C₂H₅OH)。

3.1.3无水乙醚(C₄H₁₀O)。

3.1.4 石油醚(C_nH_2n+2):沸程为30 ℃~60℃。

3.1.5碘(I2)。

3.1.6 碘化钾(KI)。

3.2 试剂的配制

3.2.1 盐酸溶液(2 mol/L):量取50 mL.盐酸,加入到250 mL水中,混匀。

3.2.2碘液(0.05 mol/L):称取6.5 g碘和25 g碘化钾于少量水中溶解,稀释至1L。

3.3材料

3.3.1蓝色石蕊试纸。

3.3.2脱脂棉。

3.3.3 滤纸:中速。

4仪器和设备

4.1恒温水浴锅。

4.2电热板:满足 200℃高温。

4.3锥形瓶。

4.4 分析天平:感量为0.1g和0.001g。

4.5 电热鼓风干燥箱。

5分析步骤

5.1 试样酸水解

5.1.1 肉制品

称取混匀后的试样3 g~5 g准确至0.001 g,置于锥形瓶(250 mL)中,加入50 mL 2 mol/L盐酸溶液和数粒玻璃细珠,盖上表面皿，于电热板上加热至微沸,保持1h，每10min旋转摇动1次。取下锥形瓶,加入150 mL热水，混匀,过滤。锥形瓶和表面皿用热水洗净,热水一并过滤。沉淀用热水洗至中性(用蓝色石蕊试纸检验,中性时试纸不变色)。将沉淀和滤纸置于大表面皿上,于100℃士5℃干燥箱内干燥1 h,冷却。

5.1.2 淀粉

根据总脂肪含量的估计值，称取混匀后的试样25 g~50 g，准确至0.1 g，倒人烧杯并加入100 mL水。将100mL盐酸缓慢加到200mL水中,并将该溶液在电热板上煮沸后加人样品液中，加热此混合液至沸腾并维持5min,停止加热后,取几滴混合液于试管中,待冷却后加入1滴碘液,若无蓝色出现，可进行下一步操作。若出现蓝色,应继续煮沸混合液,并用上述方法不断地进行检查,直至确定混合液中不含淀粉为止,再进行下一步操作。

将盛有混合液的烧杯置于水浴锅(70℃~80℃)中30min,不停地搅拌,以确保温度均匀,使脂肪析出。用滤纸过滤冷却后的混合液,并用干滤纸片取出粘附于烧杯内璧的脂肪。为确保定量的准确性，应将冲洗烧杯的水进行过滤。在室温下用水冲洗沉淀和干滤纸片，直至滤液用蓝色石蕊试纸检验不变色。将含有沉淀的滤纸和干滤纸片折叠后,放置于大表面皿上,在100℃土5℃的电热恒温干燥箱内干燥1h。

5.1.3 其他食品

5.1.3.1固体试样:称取约2 g~5 g，准确至0.001 g，置于50 mL，试管内,加入8 mL水,混匀后再加10mL盐酸。将试管放入70℃~80℃水浴中，每隔5min~10min以玻璃棒搅拌1次,至试样消化完全为止,约40 min~ 50 min。

5.1.3.2液体试样:称取约10 g，准确至0.001 g,置于50 mL试管内,加10 mL盐酸。其余操作同5.1.3.1。

5.2 抽提

5.2.1 肉制品、淀粉

将干燥后的试样装人滤纸简内。其余抽提步骤同上法5.2。

5.2.2 其他食品

取出试管,加入10 mL乙醇，混合。冷却后将混合物移入100 mL具塞量简中,以25 mL无水乙醚分数次洗试管,一并倒入量简中。待无水乙醚全部倒人量简后,加塞振摇1 min,小心开塞，放出气体，再塞好,静置12 min,小心开塞,并用乙醚冲洗塞及量简口附着的脂肪。静置10 min~20 min,待上部液体清晰,吸出上清液于已恒重的锥形瓶内,再加5 mL无水乙醚于具塞量简内，振摇，静置后,仍将上层乙醚吸出,放人原锥形瓶内。

5.3 称量

同上5.3。

6分析结果的表述

同上6。

7精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。