生态环境监测机构资质认定补充 要求中规定，初次使用标准方法前，应进行方法验证。包括对方法涉及的人员培训和技术能力、设施和环境条件、采样及分析仪器设备、试剂材料、标准物质、原始记录和监测报告格式、方法性能指标（如校准曲线、检出限、测定下限、准确度、精密度）等内容进行验证，并根据标准的适用范围，选取不少于一种实际样品进行测定；方法验证的过程及结果应形成报告，并附验证全过程的原始记录，保证过程可追溯。

01吃透标准

（1）看清标准的适用范围

该方法可以检测哪些介质样品，例如，地表水、地下水、废水等。


（2）理解透彻标准的方法原理

看懂基本的理论知识，待测物质与某种试剂的反应或者是通过什么样的方法检测出待测物质等等。

（3）注意该方法存在的干扰及消除干扰的方法

哪些因素会干扰测定结果，用什么方法可以消除或降低干扰。

（4）做实验前需要准备的物资

方法中写明了用什么试剂/耗材、仪器设备，他们的型号、规格级别与及一些特殊规定是什么都要关注。

（5）样品采集要点

采样人员要关注，样品采集运输和保存，是否需要添加固定剂，是否需要什么特殊的保存条件等等。

（6）弄懂样品分析、结果计算

分析结束后关注仪器条件、前处理步骤、分析检测，公式运算、结果表示。

（7）该检测项目的精密度、准确度范围

要留意标准方法编制组的数据，作为本实验室方法验证时的判别依据。

（8）质量保证与质量控制

室内质控要求和注意事项。

02验证步骤

（1）成立方法验证团队

在开始前应组织方法验证的团队，包括技术骨干、有经验者、采样人员、检测分析人员、质控人员，团队应分工合作，每个人的职责都需要明确。

（2）评估团队工作量

做方法验证不能追求快，也不能应付了事，应切实、认真对待，每个团队承担多少个方法验证？预留足够时间，避免承担过多，不可时间仓促。

（3）前期准备

团队建立后，不能立马开展验证，先组织学习标准，包括采样、检测分析、质控要点；然后盘点所需物资设备等。

（4）实施验证

在做方法验证过程中，不可忽略现场采样环节，按照HJ168的要求以及对应标准方法的要求开展，全面验证，对方法进行验证，并完成全过程记录。

03检出限验证

通常用重复n次的空白试验测得值的标准偏差表示。

空白试验：用实验室用水代替样品，其他所加试剂操作步骤均与样品测定完全相同的操作过程。

影响空白值的因素：实验室用水的质量、试剂（包括固定剂）中的杂质，器皿、环境及操作引入的沾污。

以上各种因素大小会变化

注意：是制备n个空白试验样品，不是用1个空白样品连续测试n次，n=？

最后计算的检出限小于或等于检测方法中检出限值，才算合格。但是实验室检出限不是越低越好。

04精密度验证

（1）校准曲线的绘制

一定要按照检测方法中的浓度系列吗？校准曲线为样品服务。

最佳定量范围：测定下限以上，即4倍检出限以上，到测定上限之间，跨度不宜过大。

（2）精密度的验证方式

a.有证标准物质：高（测定上限90%附近）、中（校准曲线中间浓度点）、低（测定下限附近）3个不同浓度水平，低浓度要在测定下限附近，评判标准依据有证标物证书参考值，按全程序每个样品测定6次

b.实际样品：1-3个不同含量水平，按全程序每个样品测定6次，评判标准参考检测方法中的要求，实际样品要有检出。

05正确度验证

（1）正确度的验证方式

a.标准物质/标准样品：高中低3个不同浓度，分别测定6次，计算相对误差均值以及变动范围。

b.加标回收：1-3个不同浓度的实际样品，分别加入一定量的有证标物，分别平行测定6次，计算加标回收率均值及变动范围。

（2）判定标准

标准物质的评判标准依据有证标物证书参考值；加标回收数据评判标准参照检测方法中要求。


06注意事项

实验室做方法验证的目的是对方法运用上的摸索和磨合，尽可能的进行最全面的验证，千万不能想着哪些环节和工作可以不做。完成了方法验证，只能说明会做了，距离能做、懂做、做得好，还隔着几百个实际样品。

（1）方法验证材料里没有采样采集、运输保存等记录。

（2）没有严格按照检测方法的步骤进行，对净化浓缩等步骤直接忽略。

（3）当检测方法中包含两种方法时，只完成其中一项的验证（例如，《水质硝基苯类化合物的测定液液萃取/固相萃取—气相色谱法》（HJ648））

（4）当检测方法的适用范围存在多种类型时，只完成其中一种的验证（例如，环境空气/污染源废气等）。

（5）对未检出的样品切勿轻视（确实含量低？技术未掌握未能提取检测？样品基质干扰？）。

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