常见的分析方法中,峰面积定量是首选的。原则上讲,峰面积是两维的数据,比峰高包含有更多的信息,用来定量更加可靠。实验中不管峰形如何(高斯峰或者非高斯峰),峰面积和样品量存在线性关系。
峰高是可以用来定量的,但一般情况下,相对于采用峰面积定量采用峰高定量的线性范围比较窄。
我们在检索比较传统的分析文献时,经常能见到使用峰高定量的场合,尤其是使用TCD或ECD检测器的分析方法。
主要原因有两个:
1.TCD是浓度性检测器,分析环境的不稳定(例如柱流量)对色谱峰高的影响比峰面积为小。
2.色谱记录条件的限制
传统的记录仪或者积分仪得到的谱图,需要手工测量峰高或者峰面积。测量峰高只需要用到刻度为mm级别的直尺,测量峰面积则另外需要读数显微镜来确定峰宽,另外还需要考虑峰是否对称、基线是否漂移等诸多因素,显然峰高的测定比峰面积要容易和准确的多。尤其是保留时间短、峰宽较小的组分,手工测定峰面积是比较困难的。
现在实验室基本采用色谱数据工作站的方法来测量色谱峰,那么色谱记录条件的不再成为限制,目前我们看到的分析方法,就比较少采用峰高定量了。
另外:
如果相邻的两个或多个色谱峰分离度较低,用峰高定量会更加准确。
如果色谱峰信噪比较低,由于基线位置不容易确定的原因,用峰高定量会更加准确。
如果色谱峰对称性较差,用峰面积定量更加准确。
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