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微生物接种培养的最全解读,最后几条很重要!

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-05-17
核心提示:一、常见培养基及其临床应用【A】血平板:即血琼脂平板培养基,主要成分包括脱脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠。羊血一方面提供一
一、常见培养基及其临床应用

【A】血平板:即血琼脂平板培养基,主要成分包括脱脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠。羊血一方面提供一些特殊生长因子,另一方面用于溶血反应的观察。

【B】麦康凯平板:麦康凯琼脂培养基简称MAC培养基。主要成分包括蛋白胨、胆盐、氯化钠、乳糖、中性红,MAC为一种选择性培养基其原理是:胆盐可以抑制革兰氏阳性菌的生长,对伤寒等沙门菌的生长有促进作用。中性红可以把能分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开,而呈现不同颜色。沙门菌及志贺菌呈无色菌落,大肠埃希菌呈桃红色菌落。不过麦康凯琼脂为一种弱选择性的培养基,一些其他的细菌也能在上面生长。

【C】不加万古霉素巧克力平板:主要成分包括哥伦比亚血琼脂、无菌羊血。当培养基加热至80-90℃时,可使红细胞破裂,以利于嗜血杆菌、奈瑟菌的生长。

【C+】加万古霉素巧克力平板:巧克力平板基础上添加万古霉素,可抑制绝大部分革兰阳性球菌。

【D】沙保弱平板:主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂粉、氯霉素。真菌对培养基营养要求不高,在高浓度葡萄糖、麦芽糖、淀粉和酸性条件下即可生长繁殖。

淋球菌平板:主要组成成分包括特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸氢钾、琼脂。

碱性蛋白胨水:主要成分为蛋白胨、氯化钠。蛋白胨提供碳氮源,较高的pH抑制肠道菌群生长,利于霍乱弧菌的生长,高浓度氯化钠满足弧菌嗜盐生长的需要。

SS平板:主要成分为牛肉粉、蛋白胨、乳糖、胆盐、柠檬酸钠、硫代硫酸铁、柠檬酸铁、煌绿、苯酚红。

罗氏固体培养基:主要成分包括蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿等。孔雀绿可抑制杂菌生长,蛋黄含脂质生长因子,能刺激生长。
 

二、如何选择培养基


三、如何接种标本

四、如何选择培养条件


五、关于接种培养的常见问题


Q:送过培养组合(一般细菌+真菌培养),能延长时间进行结核杆菌培养吗?

A:不能。一般细菌培养+真菌培养仅接种常规的血平板麦康凯巧克力等培养基+沙保弱培养基,结核分枝杆菌需要专门的罗氏固体培养基或分枝杆菌液体培养基,虽然二者培养温度相同,但营养条件不同,即使延长培养时间,也无法保证结核分枝杆菌的生长。

Q:尿培养能用尿常规管送检吗?大便培养能用大便常规管送检吗?

A:不能。所有培养标本应使用无菌容器以避免细菌污染,尿培养或大便培养应使用专用的无菌痰杯或无菌拭子送检。

Q:经过PCR检测使用后的标本,能拿来做培养吗?

A:不能。建议1份标本贴1个条码,如标本量少或实在难以取材需要共用标本,应优先进行微生物培养。因经过其他项目检测处理后的样本可能会被污染或将原有的细菌/真菌灭活,导致培养结果的假阳性或假阴性。且实验室标本应保存一段时间以备复查,共用标本后可能导致标本无法复查,建议尽量不要共用标本。

Q:为什么送检培养组合(一般细菌+真菌培养)一定要备注标本类型?

A:虽然培养目的相同(一般细菌+真菌),但不同标本类型对应接种的培养基、培养技术不同,且不同标本类型(如无菌部位VS有菌部位)在培养基上生长结果的解读不同,导致无法进行接种或结果报告。


参考文献:
[1] WS/T 805—2022临床微生物检验基本技术标准
[2] WS/T 497—2017侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南
本文结合了相关行业标准及本实验室操作规范。 
编辑:songjiajie2010

 
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