凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。

根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。

凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子，如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。

凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离，常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶，洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。

凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布，同时根据所用凝胶填料不同，可分离油溶性和水溶性物质，分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。

近年来，凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。化学结构不同但相对分子质量相近的物质，不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的。

凝胶色谱法又称体积排阻色谱法，使用水溶液流动相的称为凝胶过滤色谱，使用有机溶剂流动相的称为凝胶渗透色谱。凝胶色谱的固定相是多孔物质，如多孔凝胶、交联聚苯乙烯、多孔玻璃及多孔硅胶等。试样是按照其中各组分分子大小的不同而分离的。大于填料微孔的分子，由于不能进入填料微孔，而直接通过柱子，Z先流出柱外，在色谱图上Z早出现，小于填料微孔的组分分子，可以渗透到微孔中不同的深度，相对分子质量Z小的组分，保留时间Z长。

凝胶色谱与凝胶层析是否一样？

基本上是一致的只是固定相存在差异。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析，操作条件比较温和，可在相当广的温度范围下进行，并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。

两者的共同点是都不需要有机溶剂。凝胶色谱色谱一般用在HPLC等分析场合。而凝胶层析一般用在制备的时候。

凝胶净化柱和凝胶色谱柱是一回事吗?

原理是一回事，都是排阻色谱。 但是前者是制备柱，对大量样品进行分离，柱子口径大，一般要有切割承样的尾接装置；后者是分析柱，主要目的是对小量样品进行分析，柱子直径小，一般还有柱温箱，对泵的稳定性要求高，必须接检测器。

1、Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephadex，不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克，同样G-200克每克干胶吸水20克。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。因此，“G”反映，凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。

2、Sephadex LH-20，是─Sephadex G-25的羧丙基衍生物， 能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。交联葡聚糖和琼脂糖都是多糖类物质，防止微生物的生长，在凝胶层析中十分重要，常用的抑菌剂有：

⑴叠氨钠（NaN3）

在凝胶层析中只要用0.02%叠氮钠已足够防止微生物的生长，叠氮钠易溶一水，在20℃时约为40%；它不与蛋白质或碳水化合物相互作用，因此叠氮钠不影响抗体活力；不会改变蛋白质和碳水化合物的层析我特性。叠氮钠可干扰荧光标记蛋白质。

⑵可乐酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]

在凝胶层析中使用浓度为0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的杀菌效果Z佳，在强碱性溶液中或温度高于60℃时易引起分解而失效。

⑶乙基汞代巯基水杨酸钠

在凝胶层析中作为抑菌剂使用浓度为0.05-0. 01%。在微酸性溶液中Z为有效。重金属离子可使乙基代巯基的物质结合，因而包含疏基的蛋白质可在不同程度上降低它的抑菌效果。

⑷苯基汞代盐

在凝胶层析中使用浓度为0.001-0.01%。在微碱性溶液中抑效果Z佳，长时间放置时可与卤素、硝酸根离子作用而产生沉淀；还原剂可引起此化合物分解；含疏基的物质亦可降低或抑制它的抑菌作用。
注意事项