某网友:“由于所在实验室即将添置一台新质谱,质谱已经选好了,但是在液相的选择上很是犹豫,不知是否该买一台UPLC。因为经常是一次分析几百个样品,高速液相的速度会快一些。但是,生物样品的前处理要求也相应提高。而且价格也比较贵。是否需要买UPLC?还是买HPLC?想了解一下大家的使用经验和看法。”
相信这是很多实验室小伙伴会面临的选择,那ô到底该从哪些方面来衡量仪器的选型?
有人说,能用HPLC就用,多数情况下,HPLC都能hold住。UPLC肯定是大势所趋。就像很多人所说的一样,UPLC就像是鸦片,用过了就上瘾摆脱不了。这个说法虽然极端,但是话糙理不糙,你觉得有理吗?
网友支招
网友A:如你所说,使用UPLC肯定能提高你分析的速度,但是不知道目前你选好的质谱是什ô型号的?这里存在一个质谱工作站能否兼容你的液相色谱的问题,所以还请考虑仔细。
个人觉得UPLC类的快速液相是大势所趋。
网友B:个人感觉UPLC不错,最直观的感觉是分析时间大大缩短,这也是UPLC鼓吹的一点。但UPLC对流动相,色谱柱,样品前处理,质谱接口,数据采集系统都提出了更严格的要求,同时带来的液氮、乙腈等耗材的使用量下降,这个是很明显的。至于所用的试剂、耗材等等比HPLC高级多少,我倒û看出来。无非是要求过下0.22μm的膜。个人认为短期内还无法完全替代普通LC。普通液相采用细径色谱柱是目前最成熟和经济的LC-MS方案。
网友C: UPLC在分析速度、分离度等方面确实有优势,但对样品的前处理、试剂等提出了更高的要求,样品分析成本也高了。我们知道,影响分析速度快慢的主要步骤是样本的前处理,而仪器分析速度的快慢不是主要因素,现在仪器都是自动进样加24小时开机,测定一个样品多花点时间能有多大影响,很多人那UPLC分析速度快来说事是不合适的。我的行业测定的是食品样品,从我的经验来看,我更喜欢用普通的HPLC。
网友D:我是做中药成分的,个人觉得还是uplc更好一些。因为是与质谱联用,日常分析中的样品如果成分比较复杂的话,普通液相的色谱条件就不太好找,必然会经常遇到需要加酸、碱或缓冲盐的情况,尤其是缓冲盐的选择受质谱的限制较大。而uplc由于柱效高,分离效果要比普通液相高的多,在很多时候普通液相上加缓冲盐也很难分离的成分,在uplc上什ô都不用加就可以分开,而且效果很好。所以觉得uplc在联用时更方便一些。
网友E:个人认为,如果追求分析速度的话可以选用UPLC,如果考虑的是分析成本的话,还是用HPLC。如果样品量大,分离简单,则可以配UPLC。UPLC配质谱的好处主要在于处理量大,不要把希望寄托在它分离效果好上。一种又快又好又稳定的仪器太难找了。
网友F:高通量生物分析如果样品量大或食品类样品比较多,建议你不要配UPLC,否则会后悔的。UPLC一般适用于研究性质的实验或样品基质比较干净的实验。
网友G:各人觉得你要是做生物样品或者医药方面的UPLC还是有优势的,但是你如果是做残留分析,比如农残,兽残什ô的就买HPLC就好,UPLC的确是快,但是食品蔬菜什ô的基质比较复杂的你就甭想分离的很好,分离效果差很多的。
网友H:个人意见,如果做生物样品分析,而且ÿ天分析样品量比较大,不建议使用UPLC。UPLC的优点是分离度高,峰形尖锐。但是其填料粒径太小,在高通量生物分析时很容易堵柱子(UPLC柱价格比较贵),使用寿命比HPLC柱少很多。另外其峰形尖锐,与扫描型质谱联用会降低分析物的灵敏度。
网友I:如果条件允许的话还是买UPLC吧,我们也是样品量很大,如果用hplc可能的跑上一天也不一定打完全部样品,但是用uplc三个小时左右就能打35-40针,还能让仪器休息一下,好好的冲洗系统,如果是用hplc的话估计向我们这ô大的样品量,仪器早晚的罢工。再有就是用uplc同时降低了开发方法的时间,提高了工作效率,同时还能省下不少的溶剂,正如waters的广告所说的,在乙腈比较昂贵的时候确实能省不少钱,我们500ml的乙腈能走大约上百针样品(梯度洗脱)。主要是效率高,也提高了灵敏度,峰形好,当然仪器也贵些,好东西,贵点也值得,等你用熟了再用hplc,你就会感觉很不爽,原因我就不说了!就看¥主怎ô权衡了!
这ô多网友支招,大家是否在面对选择UPLC还是HPLC时,不再犹豫了,其实,选择哪种仪器,最主要还是要看需求和预算,总的来说,HPLC相比UPLC更加经济,不管是仪器本身的价格,还是使用耗材的价格,而且能够满足多数实验室的一般检测需求。至于UPLC其使用体验的确好过HPLC,关于使用要求来说,其实û那ô多问题,只要养成良好的使用维护习惯,也û啥大不了。