1、无机盐

培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。

培养液的渗透压是一个非常重要的因素， 细胞通常可耐受260mOsm/kg-320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。

特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。

2、 氨基酸

氨基酸是组成蛋白质的基本单位，不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。

其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。

但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。

3、碳水化合物

碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。

4、维生素

在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源， 但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。

5、缓冲系统

大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH （7.4 - 7.7）， 而传代转化细胞系则需要偏酸pH （7.0 - 7.4）。由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHCO₃）与CO₂体系进行缓冲，因此气相中的CO₂浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。

如果气相或培养箱空气中CO₂浓度设定在5%，培养液中NaHCO₃的加入量为1。97g/L;如果CO₂浓度维持在10%，培养液中NaHCO₃的加入量为3.95g/L。 

细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。 HEPES 是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g/L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。

在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中，大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。

6、 其它成分

在一些较为复杂的培养液中还包括其它一些成分。如在杂交瘤技术中常用的DMEM培养液，使用时还需要补加丙酮酸钠和2-巯乙醇（2-Mercaptoethanol，2-Me）。

2-Me 对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氢基，其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞的增殖，为非特异性的激活作用。

同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术，另外，也开始用于一些难以培养的细胞。2-Me是一种小分子还原剂，极易氧化。

分子量为78.13，纯的2-Me是一种无色有刺激味的液体，比重为1.110-1.120（Do20），常用终浓度为5×10^-5M，常配制成0.1M的储存液，用时每升培养液加0.5ml。