一 产品简介与工作原理
CMT 应用范围广,从小规模的农场到大规模的奶业收购站、加工厂或者质量控制实验室都可用到。该试剂盒适用于牛奶、羊奶中广谱抗生素的检测,也可用于原奶、热处理奶、奶粉中抗生素的检测。CMT 的检测原理是:CMT 检测管中的培养基预先接种了嗜热脂肪芽孢杆菌,并含有细菌生长所需的营养(如葡萄糖)以及pH指示剂(溴甲酚紫)。操作者无需添加其他营养成分,只需加入100ul样品于检测管中。将含有样品的检测管放入64±1℃水浴(或温浴、加热模块)中加热一段时间(时间长短视具体情况而定)。奶(或奶制品)在培养基中迅速扩散,若该样品中不含有抑菌剂(或者抑菌剂的浓度低于检测限),嗜热脂肪芽孢杆菌将在培养基中生长,葡萄糖被分解后所产生的酸会改变pH指示剂的颜色,由紫色变为黄色。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,则嗜热脂肪芽孢杆菌不会生长。pH指示剂的颜色保持不变,仍为紫色。如下图:
二 注意事项
1. 防止交叉污染.保持工作台的清洁.避免有可能影响水浴(温浴)温度稳定的环境因素。避免在高温、太阳直晒、空气流动太快的工作区工作。
2.小心操作,避免剧烈的动作使检测培养基变得松散。
3.不要使用过期的产品。
4.不要使用蒸溜水作为阴性对照。
三 检查产品的有效性
在使用本产品之前,检查附在试剂盒盖内侧的温度指示条。如果温度指示条的颜色变成黑色,此产品不能使用。如果产品有明显的损坏、脱水或污染,该产品也不能使用。该产品需要正确的储藏,不正确的储藏会损坏产品的性能。
四 试剂盒成分
1,96 孔板(可被分成6 小块,每块状16个检测孔)
2,有孔封口膜
3,颜色对照卡
五 所需其他材料(试剂盒没有提供)
水浴锅或者干燥培养箱。
六 试剂盒储存条件和稳定性
该试剂盒需要保存在黑暗的冷藏室中(+5/+16℃ 或者+41/+60F)。建议保存时不要拆开原包装。防止使产品冷冻、阳光直晒和保存在15℃以上。防止储存温度的骤然变化(储存温度的骤然变化会引起检测培养基产生气泡)。 不正确的储存条件会影响产品的检测性能和有效期。在正确的储存条件下,本产品的有效期为12个月。不要使用过期产品。
使用指南
a. 正确对应所检样品与检测孔,做好实验记录以免混淆。
b. 每快微孔板共有96个检测孔,可被分成6小块(每块状16个检测孔)。小心掰开所需数量的检测孔(用剪刀剪开封口铝箔薄膜)。注意不要损坏剩余检测孔上的封口铝箔薄膜(封口铝箔薄膜的损坏会导致孔内培养基的脱水)。
c. 撕开待用检测板上的封口铝箔薄膜。
d. 用加样器向每个检测孔加入100ul待检样本。请使用一次性的枪头,避免相邻检测孔之间由于样品泼涧、溢出所导致的交叉污染。
e. 使用试剂盒提供的封口膜将检测孔口封住.
f. 将检测板/小块放置在预热的(64±0.5℃)水浴锅(或其他的温浴装置)中温浴3小时。尽量保证温浴温度的恒定,温度的波动会导致温浴时间的延长。
为提高检测的灵敏度,当阴性对照改变颜色时判读检测结果。强烈建议每次实验设立阴性、阳性对照。阴性对照为100ul 没有抗生素残留的牛奶(或羊奶),阳性对照为仅含有青霉素G(浓度为MRL)的牛奶(或羊奶)。
质量控制
所有制造该试剂盒的原材料和终产品都经过Copan公司严格的质量控制。
CMT 具有很广的检测范围。它能检测内酯 磺胺类抗生素、四环类抗生素、大环内酯类抗生素、胺基糖苷类抗生素、黄胺类抗生素、三甲氧苄二胺嘧啶以及其他抗生素。
结果判读
颜色判读
在64±0.5℃条件下温浴3 小时后,从检测孔底端和侧面判读颜色变化。可根据试剂盒提供的颜色对照卡来判断检测结果。
黄色表明该样品没有抗生素残留或抗生素残留的含量低于试剂盒的检测限(阴性)
紫色表明该样品中含有抗生素残留,且浓度高于试剂盒的检测限(阳性)。
如果颜色介于黄色和紫色之间,则表明该样品可能不含有抗生素残留或抗生素残留的含量低于试剂盒的检测限(部分阳性)。请参照颜色对照卡来判断结果。
Copan CMT 颜色对照卡:
检测限
该试剂盒对于抗生素类的检测限为4ppb。
取样操作指南
本试剂盒含有96个检测孔, 每次最少可以分成16个检测孔以备使用。如果待检样品数量不大,可以选择Copan单孔检测试剂盒以避免不必要的浪费。
在取样阶段,必须小心谨慎,以避免污染。使用干净的取样和送样设备,样品检测应在取样后的小时内检测,同时样品要冷藏。样品中的保鲜剂可能会抑制微生物的生长,从而影响检测结果的准确性,所以,含有保鲜剂的样品不宜检验。
在取样过程中,没有必要戴手套,但是手要洗干净。注意在操作中不要污染多次性取样送样设备(比如多用注射器)。
充分混匀待检样品和对照后,使用一次性的枪头将样品加入到检测孔中。小心操作,避免泼涧、溢出和相邻检测孔间的交叉污染。
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