问题一、不同培养基的灭菌条件不一致,是否可以合并成一个灭菌条件?
答:培养微生物的培养基灭菌条件常见有三种,如下表1,如果没有遵从如下灭菌条件,可能会导致最后的培养结果有偏离。
表1常见微生物培养所需的培养基
问题二、在实际工作中,由于一些原因导致微生物培养时间与标准规定培养时间不一致,培养结果是否可以接受?
答:同样依据表1,如果培养时间与标准规定培养时间不一致,如实际培养时间多于或少于标准规定的时间范围都会影响试验结果。因为一般的微生物在一个相对稳定的环境中的生长曲线是“S”形,培养时间多一些或少一些可能会对试验结果有重大影响,别人也无法重复试验结果。
问题三、微生物培养箱能否放置在接种室?
答:不能。会有交叉污染的风险,此外如果接种室是利用臭氧来消毒的话,臭氧会影响培养箱里面正在培养的微生物。
问题四、霉菌培养箱、细菌培养箱能否放置在同一个房间培养?
答:可以。有条件的话可以分不同的房间。
问题五、霉菌和细菌是否可以用同一个培养箱培养?(分时段单独培养)
答:不可以。通过表2就可知,虽然霉菌培养箱和生化培养箱具备培养细菌、霉菌、酵母菌的能力,但是一般的微生物检测是细菌、霉菌和酵母同时进行,如果用同一个培养箱分时段单独培养很难证明试验结果的有效性;同时,企业的生产一般是连续的,导致微生物检验也是连续的,一个培养箱也满足不了实际质控的要求。
表2三种培养箱的对比
问题六、如何对培养箱进行消毒?
答:培养箱需要定期消毒。一般的消毒剂为75%的酒精;由于培养箱内胆材料一般为不锈钢,所以不适合用次氯酸钠或苯扎溴铵,因为这些消毒剂对不锈钢有腐蚀性。
问题七、对于外购的培养基,开瓶之后的可以保存多久?
答:对于外购的培养基,开瓶之后的有效期需要经过验证才能确定,一般情况下开瓶之后一年内都可以使用。
问题八、灭菌后的培养基的可以保存多久?
答:灭菌后的培养基的有效期同样也需要验证,一般经验为冰箱4℃保存建议一周内使用完,室温保存不超过3天。用来封口的塞子最好是规格统一的,不然验证就没有意义。
问题九、可以使用微波炉来溶解培养基吗?
答:灭菌后的培养基室温放置一段时间后会凝固,使用前需要溶解,通常采用水浴的方式。使用微波炉也可以,不过需要验证。
问题十、培养箱中培养的培养皿是正着放置还是倒着?
答:培养箱中培养的培养皿需倒扣,第一有利于微生物向上吸收营养物质,第二避免培养皿盖上的冷凝水污染微生物。但新国标要求霉菌检测的平皿是需要正置培养的。
问题十一、什么时候需要做空白对照和阳性对照?
答:微生物试验都要求做空白对照;但是不同的参考标准对阳性对照规定不一样,中国药典规定需要做阳性对照,美国药典、欧洲药典和日本药典没有强制规定。
问题十二、一般的微生物检验室需要生物安全柜吗?
答:不一定。微生物检验室的分类及所需的主要设备,如表3。
表3微生物检验室的分类及所需的主要设备
问题十三、该怎么选择合适的生物安全柜?
对于实验室生物安全柜的安装及使用,在GB 50346-2011《生物安全实验室建筑技术规范》中有很详细的说明,表4为生物安全实验室选用生物安全柜的原则。为了更多的了解生物安全柜的知识,可以阅读JG 170-2005《生物安全柜》和YY 0569-2011《II级生物安全柜》等资料。
表4生物安全实验室选用生物安全柜的原则