小反刍兽疫(PPR),也称羊瘟,是由副黏病毒科麻疹病毒属小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的,以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征的急性接触性传染病,山羊和绵羊易感,且山羊发病率和病死率均较高。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。除山羊外,PPR感染并不具有明显的临床症状,加之其传播迅速,病程较短,因此快速确定疫情并采取有效的防控措施,对于保护地区经济,保护养户生产经营热情具有重要意义。
根据《小反刍兽疫防治技术规范》要求,病原学诊断是PPR确诊的重要依据,推荐的方法包括病毒的细胞分离鉴定、聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA),检测条件为生物安全三级实验室(BSL-Ⅲ)。限于实验器材和技术难度,上述均方法无法在生产现场开展。由此而发生的采样、送检、结果报告等过程时滞,对于疫情控制亦造成了不可避免的延误。
核酸恒温扩增技术的成熟发展催生了现场分子诊断方法。以基因试纸卡为例,该技术融合了核酸诊断方法的灵敏特异及试纸法判读的简单方便,仅需恒温装置和低速离心机即可完成全部操作,对检测环境无限制要求且不产生任何生物污染。基因试纸卡实现了核酸诊断技术的现场化使用,在疫病净化、引种筛查及生产、加工现场检疫等方面具有广阔的应用前景。
利用现场分子诊断技术,结合流行病学分析,当动物出现口腔炎症症状、呼吸道症状等PPR早期症状,即可对其口鼻拭子进行基因试纸卡检测。基因试纸卡的易操作、低成本,以及特异性和灵敏性,为PPR的早发现、早确诊提供了有力的工具。