食用菌菌种的保藏技术 |
来源:辽宁金农网 |
菌种是重要的生物资源,是食用菌生产的重要因素。菌种内在质量的高低及遗传性状的优劣决定着食用菌的生产能力,是内因。在相同的栽培条件下,良种比一般品种可增产三成以上,甚至成倍增长。但选择出的优良菌种,如果管理不好,就会引起衰退,污染杂菌,造成减产,因此,保藏菌种和选育菌种具有同样重要的意义。在生产中由于原种和栽培种数量大,不易保藏,菌种生产者通常以母种形式保藏食用菌菌种,栽培前再进行扩接用于生产。菌种通过保藏,控制其生长,使优良菌种不衰退,不变异,不死亡,不被杂菌污染,以保证在生产上长期应用。 菌种的保藏方法很多,常用的有低温保藏法、液体石蜡保藏法、麦粒保藏法、盐水保藏法等多种保藏方法,菇农可根据自身条件加以选择。有条件的地方,同一菌株最好用几种方法同时保藏。 1、斜面低温保藏法:是菌种保藏最常用的方法。即将菌种在适宜的斜面培养基上培养成熟后,放入4—6℃冰箱中保存,一般3—5个月移植一次。为使菌丝体在培养基上不干、不死,以延长保藏时间,应做到以下几点。一要使用营养丰富的天然培养基,使菌丝体发育健壮。二要将试管棉塞齐管口处剪平,用矿蜡封严,再包扎一层塑料薄膜,以减少培养基水分的散失,延长保藏时间。三要加大试管内琼脂培养基的用量,使每管不少于12毫升,适当摆长斜面,以延缓水分的损耗。四要在配制保藏培养基时加入少量缓冲剂,一般加入0.2—0.3%的磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。五要设置一个永久性的保藏冰箱,与经常取用菌种的冰箱分开使用,不要随意或过多的打开冰箱,以保持冰箱内温度的稳定。六要在菌种培养基干缩到一定程度时,再取出转接试管,一般应每隔一定时期调换一次培养基配方,以补充营养、水分,消除菌丝体代谢产物的影响,保持菌种正常的生活能力。 2、石蜡保藏法(即矿物油保藏法):在菌种斜面上注入一层无菌的液体石蜡,使菌丝体与空气隔绝,以降低代谢活性,从而达到保藏的目的。此法一般可保藏2—3年,但最好1—2年移植一次。加了石蜡的菌种,置于室温下保藏比放在冰箱中保存更好。液体石蜡在使用前,经高压灭菌2—3小时后,再在40℃烘箱中烤干水分。液体石蜡的装入量以淹过斜面尖端1厘米为宜,然后塞上棉塞(最好将棉塞齐管口剪平,用矿蜡密封),放于清洁避光、4—15℃常温下保存。在保存期间应定期检查,发现培养基露出液面,应及时补充灭菌液体石蜡。据试验,在5—28℃之间保存6年出菇率正常。使用时,可用接种铲直接挑取少许菌丝,接种于另一斜面培养基上。刚从液体石蜡菌种中移出的菌丝体,常沾有较多的石蜡,生长较弱,需再转管1次,方能恢复正常。 3、盐水保藏法:这是利用担子菌在液体振荡培养时,形成菌丝体球形颗粒的特性,用液体培养法培养食用菌菌丝球,然后进行保藏的一种方法。将液体培养1周左右,挑出菌丝体,加入盛有生理盐水(0.85克食盐溶于100毫升水中,高温高压灭菌后即成生理盐水)的试管中,封存后可在常温下存放2年,不影响菌种的存活和形成子实体。其方法是:用300毫升的三角瓶,装入50—60毫升培养液(培养液采用马铃薯培养基,但不加琼脂),接入新鲜菌种1块(无菌操作),在28℃、180转/分的摇床中振荡培养5—7天。然后用无菌吸管从摇瓶中取出5—6个菌丝球,置于生理盐水试管中(普通小试管可装5毫升生理盐水),用棉花塞紧管口,以蜡密封,放在4℃以下或常温下保藏。使用时开启管口,挑出菌丝体,放在斜面培养基上培养。 4、自然基质保藏法 (1)麸皮保藏法:水与新鲜麸皮按1:0.8的比例混合拌匀,装入试管,占管深的2/5,洗净管壁,加棉塞,121℃灭菌40分钟,接入白灵菇菌种,24—28℃培养6—8天,菌丝在培养基表面延伸即可。用真空泵抽干试管内水分,棉塞上滴加无菌凡士林,置干燥器内常温下保存,2—3年转接1次。 (2)木屑保藏法:按配方(阔叶树木屑78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏1%,料水比1:0.8)配制培养基,装入试管中,占管深3/4,121℃灭菌1小时,接入白灵菇菌丝,24—28℃培养,当菌丝长到管深的1/2时,用接种钩挑去老接种块,石蜡溶封管口,包上塑料薄膜,冰箱中或常温下保存,1—2年转接1次。启用时,先将菌种活化培养12—24小时,再挑取木屑内菌丝使用。 (3)麦粒保藏法:取健壮麦粒,淘洗后浸水5小时(水温20℃),捞出稍加晾干,装入试管,装量以1/4到1/3为宜,然后灭菌,灭菌后趁热摇散,放置冷却,向每支试管内接菌丝悬浮液1滴,摇匀,在24—26℃下培养,当大多数麦粒出现稀疏的菌丝体时,终止培养,保藏在冷凉、干燥处(麦粒含水量下超过25%)。 5、担孢子滤纸保藏法:在孢子弹射装置内放数张小条黑色滤纸,整个装置高温灭菌。采收菌幕将开、八九成熟的白灵菇子实体,先将菇体浸在0.1%升汞液中杀菌1—2分钟,用无菌水冲洗掉升汞溶液,再用无菌纱布揩干菇体,将菇体插在孢子弹射装置内的支架上,在22℃下培养2天,孢子即可弹射到滤纸条上,然后将滤纸条卷起,置无菌小试管内塞上棉塞,用两层以上牛皮纸包好试管口,置无菌干燥器中1—2天,除去滤纸条上过剩的水分,放在冰箱中保存。使用时,剪取一小段滤纸条,刮取上面的担孢子,让孢子萌发成菌丝体,通过出菇实验筛选菌种,用于生产。用此法可保藏3年以上。 |
食用菌都具有高蛋白,低脂肪、低胆固醇的特点,含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、多种维生素和矿质元素等成分