在反应用玻板上，将血清和菌液各一滴（0.5ml）滴置，用搅拌棒充分混合后，将玻板置前后左右倾斜观察，在3min内出现明显的颗粒为阳性，反应温度以20～25℃为适。

　　7.2.2试管内凝集反应

　　血清从5倍开始，按倍比稀释（各管0.25ml）。各梯度血清加等量菌液，充分混合后，在37℃放置2h，再在5℃中静置16～18h。以上有明显凝集（＋＋以上）的最高终末稀释倍数作为凝集价，凝集价在10以上为阳性。

　　7.2.3红血球凝集抑制实验

　　血球液为鸡红血球，以生理盐水洗3次以上，在同液内5%悬浮。血清及菌液的稀释均用生理盐水。

　　红血球凝集反应：菌液由5倍开始，倍比稀释（各管0.4ml）加等量的血球液，充分振荡混合后，在室内静置40～50min。根据管底情况来判定，以呈现凝集阳性的菌液稀释倍数作为抗原效价。

　　8预防与治疗

　　8.1综合防治措施

　　杜绝引入病鸡和带菌鸡。平时加强鸡群的饲养管理，特别注意鸡舍通风和清洁卫生，使鸡群的饲料营养合理，多喂些富含有维生素A的饲料，以提高鸡群的抵抗力。本病发生后，应隔离病鸡，加强消毒和检疫。病鸡即使经过治疗康复但也不能留做种用。除非知道鸡群来源于IC鸡场，否则只应购买1日龄鸡作为后备鸡。预防和控制本病的理想措施是远离老鸡群进行隔离饲养。要从鸡场中清除病原，必须首先清除感染鸡或康复鸡，对鸡舍和设备进行清洗和消毒后，再重新饲养清洁鸡之前，禽舍应空闲2～3周。

　　8.2疫苗免疫

　　主要为灭活疫苗。有HPGA型和C型菌单价苗及将A型和C型等量混合的灭能苗，还有A型苗的新城疫病毒混合苗及在其中再将传染性支气管炎病毒混合的疫苗。

　　疫苗使用注意事项：由于鸡副嗜血杆菌为革兰氏阴性菌，含有内毒素。因此，疫苗接种后会有不同程度的反应，故在免疫鸡群时应密切观察鸡群的体况，体质虚弱应暂缓接种；鸡群发病后最好通过血清学方法分离鉴定细菌，确定本地区鸡副嗜血杆菌的流行菌型。从而选择相应的血清型疫苗，不赞成直接使用多价苗；注射途径所引起的免疫反应强度不同，皮下和肌肉注射两种途径都有效，经腿部肌肉注射提供的保护较经胸部注射的效果好，经鼻腔接种无效。

　　8.3药物防治

　　各种磺胺药物和抗生素对减轻本病的严重程度和缩短病程都有作用。应当注意细菌产生耐药性。

　　8.3.1环境因素可影响药物治疗的效果。因此，应加强在日常和治疗中的饲养管理和卫生管理。如将发病鸡隔离饲养，每天对发病鸡舍消毒，保持鸡舍良好的卫生条件。

　　8.3.2选择敏感的药物，防止耐药性。用药时最好选择2～3种有效药物联合应用。

　　8.3.3用药途径。由于本病主要通过病鸡排毒污染饮水进行传播，通常药物饮水既可杀菌又可治疗。

　　8.3.4保证用药的剂量和时间，不得中途停药。

　　8.3.5药物与疫苗联合应用，防止疾病反复，对于体况尚且良好或发病鸡数尚少的鸡群在用药的同时可注射相应的灭活疫苗，这样在治疗结束后可产生较强的免疫力。