名称 |
机制 |
转染效率 |
用途 |
优缺点 |
影响因素 |
磷酸钙转染法 |
内吞作用 |
20%细胞被转染 |
瞬时表达 |
1、简单有效 2、适用于贴壁、非贴壁细胞 3、常作首选方法 |
1、Ca2 ,DNA浓度 2、PH值,沉淀反应时间 3、氯喹,甘油和丁酸钠处理 |
DEAE葡聚糖转染法 |
抑制核酸酶 内吞作用 |
在BDC-1,CV-1和COS细胞中较高 |
瞬时表达 |
操作简单 |
1、需高浓度DNa 2、DEAE葡聚糖浓度 3、温育时间 |
Poly-brene转染法 |
不清楚 |
低分子量DNA转染率高于磷酸钙法 |
CHO细胞的稳定转化子 |
能得到较多的稳定转化子 |
1、受体细胞类型 2、转染调控信号 3、DNA浓度 |
原生质体融合 |
胞膜融合 |
50-100%转染,稳定子得率为0.2-0.02% |
瞬时表达 稳定表达 |
1、操作复杂 2、不能进行共转染 3、慎用于筛选营养缺陷型变异株 |
1、溶菌酶、PEG浓度 2、温育时间 |
电穿孔 |
高压在膜上形成微孔 |
效率较高 |
瞬时表达 稳定转化 |
1、需精密仪器 2、可用于动物、植物细胞和细菌 |
1、电场强度 2、脉冲长度 3、温度,DNA浓度 4、培养液 |
脂质体 |
脂膜融合 |
50-60%转染 |
瞬时表达 稳定转化 |
1、操作简单 2、可用于体内试验 |
1、脂质体质量 2、DNA浓度 |
胞核微注射法 |
直接注射 |
50-100%转染 |
稳定转化 |
1、需要特殊仪器 2、处理样品数量少 3、高效 |
1、注射技术 2、DNA浓度 |