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细胞的生长参数

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-07-08

1.翻倍时间(Doubling Time)

细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的参数中是最容易测量的。翻倍时间应该在细胞处于对数期复制时测量,对于Sf9和Sf21细胞来说通常是介于16-24小时之间,不过大多数在20-22小时。

dt=t×ln2/ln(Ct/Co),其中dt为翻倍时间,Co为起始细胞数目,Ct为经过时间t后的细胞数目,t为Co和Ct两次计数之间的间隔时间,所有的时间都以小时为单位。

2.细胞大小(Cell Size)

细胞的大小是监测细胞健康程度的一个非常有用的参数。如果细胞是健康的,细胞的大小均一,都处于该细胞株体积正常变化范围的下限。细胞的大小在不同的细胞株变化是很大的。对于我用过的Sf9和Sf21,典型的直径是16-18mm,不过我知道有些细胞株小至14 mm或者大至19 mm仍然很健康。

3.滞后期(Duration of Lag)

当细胞的密度较低时,会有一个滞后期,其长短取决于分装或者传代后细胞的密度。一般说来,该密度越低,滞后期越长。对于一个特定的细胞株来说,当这个密度高出一个阈值时,滞后期的长短与密度无关;而低于一个阈值时,滞后期无限长,细胞不再增殖。

4.低密度分装极限(Low Density Split Tolerance)

能够在一个较短的滞后期(小于12小时)复苏的细胞形状较好。不过这是细胞株的特性,需要进行实验来确定你的细胞株的密度极限。我的细胞株有些在分装成密度为5×104细胞/ml时仍然可以很好复苏,有些细胞株分装成5×105细胞/ml就不能复苏了。

5.高密度极限(High Density Maximum)

这是你的细胞能生长的最大密度,高于这个密度你的细胞将进入平台期。这个指标既和细胞株有关,又和使用的培养液有关。我建议先把你的细胞株培养至平台期,然后把一些分装到新鲜的培养液中以后,使剩下的继续生长至平台期,同时密切监测细胞状况。一般来说,细胞的培养要避免密度超过高密度极限的80%。对于我培养的细胞,这个极限值从2×106至12×106细胞/ml不等。

 
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