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高通量细胞筛选技术(high throughput cell-based screening tech

放大字体  缩小字体 发布日期:2006-07-08

高通量细胞筛选技术(high2throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功能最有效的方法之一。通常,基因功能的初步筛选在96 孔或384 孔板上进行,通过基因转染将候选基因导入细胞,或直接将基因表达产物加入细胞培养液中。筛选测定方法基于要研究的生物学或医学问题,例如,要研究抗血管生成活性,选用内皮细胞进行细胞生长、分化、迁移和粘附等分析测定;研究免疫调节活性,可选择淋巴细胞或造血细胞进行细胞生长和分化的分析测定;研究神经营养因子活性,可选用神经细胞进行细胞存活、突起生长测定。除上述与细胞表型或形态学相关的检测指标外,细胞信号转导通路、糖代谢、能量产生和代谢产物分析(metabolic control analysis) 等代谢通路也是基因功能重要的研究内容。

  结合抗体芯片技术、多路测定技术(multiplexing) 等新的检测方法[12~14 ] ,高通量细胞筛选的应用更为广泛。另外,随着荧光成像读板仪(fluorescence image plate reader ,FLIPR) 、定量PCR、高通量荧光激活细胞分类器(HT2FACS) 等检测方法和技术的不断发展和应用,灵敏度和重现性这两个高通量细胞筛选的关键问题也逐步得以解决。

初筛得到的基因通常选用二级分析模型进行功能验证,验证方法可能通量略低,但与功能的相关性更强。


 
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