插入突变已经成为众多物种的功能基因组学研究中的核心方法。在小鼠中,改良的载体和方法使得我们更为简便地,在基因组范围内依据表型进行插入突变(insertional mutagenesis)筛选。如果我们能制作等位基因都突变的小鼠胚胎干细胞,就可以在体内分析之前就提前筛选到具有特殊无义突变的表型(specific null phenotype)。另外,在脊椎动物中发现的活跃的转座元件(transposable element),以及由此开发出来的遗传学工具,促进了在小鼠体内正向插入突变筛选基因的应用。这些新技术将会大大加快我们彻底解析小鼠基因组的步伐。
(插入突变策略和机制)
(胚胎干细胞的表达捕获法)
P, promoter; pA, polyadenylation signal; SA, splice acceptor; SD, splice donor; nitroreductase, NTR; RACE, rapid amplification of cDNA ends。
(小鼠插入突变工具的比较)
(基因捕获方法)
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INSERTIONAL MUTAGENESIS IN MICE: NEW PERSPECTIVES AND TOOLS. Nature Reviews Genetics 6, 568-580 (2005)