材料与试剂
1.抗原 人工感染急性阿留申病貂组织提纯抗原。
2.标准阳性血清和阴性血清,供试验对照。
3.待测血清
4.琼脂糖
5.0.05Mol/L pH8.6巴比妥缓冲液
6.玻璃板 10cm×4.5cm。
7.打孔器 孔径3mm。
8.微量加样器 100µl。
操作方法
1. 制琼脂糖板 1%琼脂糖,10ml铺于10×4.5cm的玻板上,厚度约3mm。
2. 打孔 孔径3mm,孔距8mm。
3. 加样 待检血清加入阳极孔,抗原加入阴极孔,每孔10ul。同时设标准阳性和标准阴性血清对照。
4. 电泳 抗原孔置阴极端。双层滤纸搭桥,电压90V~100V,电泳时间30min~60min。
结果测定
在对照组成立的情况下,在抗原和待测血清之间形成一条清晰灰白色沉淀线,稍偏向血清孔,为阳性。
注意事项
1. 抗原必须低温(-25℃)保存。4℃保存一周。
2. 电泳必须用纯度较高的琼脂糖,缓冲液pH8.6,电压不超过100V,否则影响检查效果。