关于血细胞分析仪的几个问题

　　一．发展简史

　　1947年美国科学家库尔特(W.H.Coulter)发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功，其原理是根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定，这种方法称为电阻法或库尔特原理。1962年，我国第一台血细胞计数仪在上海研制成功。到了60年代未血细胞分析仪除可进行血细胞计数外，还可以同时测定HGB血红蛋白。70年代，血小板计数仪问世。80年代，开发了白细胞分类(3分类及5分类)。90年代，开发出了可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪，同时5分类及幼稚细胞检测更成熟，并发展成为血细胞分析流水线。

　　二．如何选购血细胞分析仪

　　当前，在我国境内销售的的血细胞分析仪品牌很多，给医院的选购造成了一定的麻烦。如日本SYSMEX公司(东亚医用电子株式会社)的血细胞分析仪系列、美国库尔特公司(现已被贝克曼收购)的血细胞分析仪系列、日本光电公司的血细胞分析仪系列、美国丹能公司以及瑞典博尔医疗公司的血细胞分析仪系列。因此建议医院购买时从以下几个角度考虑：

　　1.实用性。医院应该根据自身的能力和标本量来决定购买何种档次的机器，不要盲目攀比，争相购买高档机器，从而造成仪器购置的浪费。

　　2.仪器性能。这是最关键的一个因素。不能完全相信厂家的宣传，要多听取专家意见和到友邻单位了解。 　

　　3.价格比。衡量同档次机器的价格。

　　4.售后服务。俗话说：救人如救火。对机器也是一样，机器损坏待修时间过长会造成病人对医院的信誉度下降，久而久之就会造成病人的流失。所以，机器的售后服务也是一个必须考虑的因素。

　　5.辅助设备、试剂、消耗品和零配件价格。

　　要建立请专家进行论证的制度，纠正过去由院长一人说了算的错误做法。

　　三．如何验收血细胞分析仪

　　1.验收前准备工作：仔细阅读说明书；按说明书要求准备仪器的工作环境和相关的外部设备；成立验收小组；拟定验收计划。

　　2.开箱：必要时请商检局派人参加；开箱后按照装箱单清点物品是否和装箱单一致。

　　3.安装：应该对安装过程进行详细的记录。

　　4.验收仪器的技术性能指标

　　(1)测定仪器试剂的本底；

　　(2)检测仪器的精密度：用高、中、低值新鲜血标本各测10次，计算X－S、 CV值，取20～30个标本随机排列，各测3次，求出总重复性CV%，它代表批内精度、仪器稳定性、互染等因素的总和；

　　(3)互染率：取高、低两个浓度全血(高、低值相差4～5倍)，先测定高浓度3次，接着测低浓度3次，再测高浓度3次，计算高对低、低对高的互染率；

　　(4)线性：取全血标本，用盐水稀释相当于全血的90%、80%、70%……，测得RBC、WBC、HGB结果做y=a bx,a接近于0，b接近于1；

　　(5)校准：应由厂家提供全血校准物(低档仪器用校准颗粒及HGB校准液)进行校准；

　　(6)上述指标必须符合该仪器的出厂指标，才算验收合格。由验收小组成员、安装工程师及设备科同志签字后存档。

　　四．如何对血细胞分析仪进行校准

　　仪器经使用一个阶段后应该作一次全面的校准，因为仪器本身是个比较器。一旦仪器产生漂移将带来分析误差及不精密度，所以仪器应该经常定期校准。

　　1．仪器校准前准备：彻底清洗管道，去除管道中的残留血液、吸附的蛋白和纤维等，然后测定试剂空白，本底必须符合要求。

　　2．校准物准备：检查校准物是否在有效期内，外观有无变质。从冰箱中取出后，必须平衡至室温，轻轻混匀，小心打开瓶盖，勿使血液溅出，分装成两瓶。

　　3．在仪器上测定校准物，连续测定11次。第1次结果弃置不用，将2至11次结果计算 出 X S，绝对误差，相对误差。

　　4．核对实测结果与校准物所示结果，检查实测结果有无升高或下降的趋向性。

　　5．判断校准结果：校准标准要求如下表1。(1)如果各参数的绝对值误差和相对误差小于一级要求，属合格范围，不须作任何校准。(2)如果参数大于一级要求，小于二级要求，可按说明书要求调整系数。当调整后，可再测定另一瓶全血标准物，理应达到小于一级要求水平。(3)如果结果大于二级要求，则需通知厂家派工程师修理或调整，为保证病人标本测试质量，该仪器应暂停使用。

表1 校 准 标 准 要 求

　　五．使用血细胞分析仪的注意事项

　　为了保证使用血细胞分析仪得出的结果能够尽量反映病人的真实情况，在使用时必须注意以下几方面：

　　1．血样：由于静脉血受外界因素影响较小，成份比较稳定，检测结果准确度高重复性好，因此除婴儿外，建议取血者均应采用静脉血。如果采集未梢血时，注意不可局部过度挤压，避免血液中混入大量的组织液，而且易激活凝血系统产生局部凝血，导致检测结果的误差；第一滴血由于细胞成分不稳定应弃掉，用第二滴血进行检测。

　　2．抗凝：使用拘橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶，细胞形态易发生变化，影响计数结果的准确性；草酸盐易使血小板产生凝集，并可使白细胞形态发生变化，影响计数结果及分类；而肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少；EDTA-2Na较EDTA-2K的可溶性低，血小板凝集的可能性大。因此国际血液学标准委员会(ICSH)1993年发表的文件中建议使用EDTA-2K作为血细胞分析仪的抗凝剂，用量为1.5～2.2mg/ml血。

　　3．采血后用塞子密闭，室温保存不超过6小时。

　　4．稀释：稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定，否则易引起“稀释性溶血”。

　　5．混匀：检测前混匀很重要，如果无旋转式混匀器应颠倒混匀至少8次。

　　6．试剂：血细胞分析仪对试剂的要求非常严格，要求有严格的渗透压标准、稳定的导电率、高标准的纯净度以及对仪器管道和阀路无腐蚀作用。因此溶血剂、稀释液及清洗剂等最好选用原厂配套产品。

　　7．白细胞分类：首先必须明确，迄今为止，世界上无论多先进的血细胞分析仪，进行的白细胞分类都只是一种过筛手段，并不能完全取代人工镜检分类。要坚决纠正有些单位用了血细胞分析仪就丢掉镜检的错误思想。

　　8．质量控制：血液分析必须建立严格的质量控制制度，才能保证结果的可靠性。

　　六．现代血细胞分析仪的主要进展

　　随着高科技的引用和基础医学的发展，各种先进的血细胞分析测试技术被应用到血细胞分析仪上。1987年Coulter公司发明的VCS(Volume，V，体积；Conductivity，C，电导性；Scatter，S，光散射)技术可使血细胞未经任何处理，在与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血细胞分析仪中采用了阻抗和射频技术联合的白细胞分类法。进入90年代后，仪器的自动化程度增高(达到120份/小时)；可进行多参数分析(高达30余项)；精密度高(重复计数；保证微孔管清洁；取中段血；运动流式细胞计数原理；鞘流原理……)；向5分类及鉴别幼稚细胞发展；准确度好，全面质量管理，保证仪器检测可靠性；具有智能化，可对同一病人诊断的前后进行对比，提出综合意见，确定诊断方向；更加注意保护操作人员的安全(SLS-Hb、自动混匀、进样、吸样针内外清洗等)；向流水线发展，将血细胞分析仪、网织红细胞计数仪、推片、染色机联成流水操作线。

　　最后，再强调一下，坚决反对用了血细胞分析仪后就不进行镜下复检和分类的错误倾向。