葡萄酒酿造中乳酸菌的变化
一、 自然乳酸菌群体在红葡萄酒酿造过程中的变化
Carre(1980)研究了自然乳酸菌群体在红葡萄酒酿造过程中的变化。供试的葡萄醪含糖量在220g/1,PH3.5,在酒精发酵前进行或不进行SO2(100mg/1)处理。在葡萄醪中,活乳酸菌为104/ml。SO2处理仅使其群体数量减少十分之一;在酒精发酵过程中,活乳酸菌数降至102/ml。这些乳酸菌为自然选择菌体,非常适应葡萄酒的环境。在分离过程中,虽然皮渣带走了部分乳酸菌,但无论葡萄醪是否经过SO2处理,葡萄酒中的乳酸菌群体均由于环境中微生物的接种上升至104/ml。在酒精发酵结束并分离葡萄酒以后,在未进行SO2处理、温度190C的良好条件下,乳酸菌立即进入繁殖阶段。繁殖阶段持续10天左右,群体量达3×107/ml;12天后,苹果酸——乳酸发酵结束,乳酸菌进入平衡阶段。
在酒精发酵开始前对葡萄醪的SO2处理,降低乳酸菌的繁殖速度和最大群体数量107/ml,葡萄酒分离25天后,乳酸菌进入平衡阶段,苹果酸——乳酸发酵在分离30天后结束。如果在葡萄酒分离后将温度由190C降至140C,乳酸菌群体数量则首先下降,而且繁殖阶段也仅仅使其群体数量不超过106/ml,苹果酸——乳酸发酵在乳酸菌群体数量达最大值后14天结束。最后,如果在葡萄酒分离时再进行SO2(50mg/1)处理,乳酸菌群体数量下降幅度更大,其生长繁殖开始时的群体基数仅为102/ml,而且其最大群体数量也仅为104/ml;在分离后44天,苹果酸——乳酸发酵停止时,仍残留1.7g/1苹果酸。
此外,与葡萄醪中的酵母群体相反,较大的乳酸菌群体以平衡状态在葡萄酒中保持很长时间。因此,在良好的条件下,葡萄酒酿造过程乳酸菌的生长周期包括以下几个主要阶段:
1、 潜伏阶段:这一阶段对应于酒精发酵阶段,乳酸菌群体数量下降,但保留下最适应葡萄酒环境的自然选择群体。
2、 繁殖阶段:出现在酒精发酵结束后,乳酸菌迅速繁殖并使其群体数量达到最大值。
3、 平衡阶段:乳酸菌群体数量几乎处于平衡、稳定状态。在适宜的条件下,该阶段可持续很长时间。
二、 由乳酸菌引起的病害
从苹果酸——乳酸发酵的角度看,在干红和干白葡萄酒的酿造过程中,乳酸菌是提高葡萄酒质量的因素。在不含糖的葡萄酒中,苹果酸是最容易被乳酸降解的物质。但是,在葡萄酒中,乳酸菌同样可以分解其它的成分,造成挥发酸含量的升高,引起葡萄酒的各种病害。在有利于其生长发育的条件下,如PH值较高(3.5-3.8),温度高于160C,游离和结合态,SO2浓度低等,如果在苹果酸完全消失后不及时采取措施,那么所有的乳酸菌都可变为病原菌。因为它们可以以酒石酸、甘油、糖等为活动基质,分别引起酒石酸发酵病、苦味病、油脂病、甘露糖醇病等。
三、 在有苹果酸条件下乳酸菌的糖代谢
乳酸菌在分解苹果酸的同时,必须发酵少量的糖,以保证其生长所需的能量。Brechot(1974)和Lucmaret(1981)研究了在含有苹果酸的人工培养基和葡萄汁中乳酸菌的糖代谢,结果表明:
1、不管基质中是否含有苹果酸,乳酸菌群体在繁殖阶段所形成的醋酸量都很少。
2、如果基质中含有苹果酸,则所有苹果酸均在繁殖阶段被分解。
3、醋酸主要在乳酸菌群体的平衡阶段中形成,其形成的量与基质的含糖量成正比。
由此说明,苹果酸本身并不导致醋酸的形成。在乳酸菌的繁殖阶段,即苹果酸的分解过程,乳酸菌的糖代谢亦不形成醋酸。这可能是由于在这一阶段中,乳酸菌的能量要求更大,其发酵糖果的途径主要为释放能量更强的糖酵解途径,而不是乙酰磷酸途径。
总之,在乳酸菌的繁殖阶段,糖的分解并不是导致大量醋酸的生成。在这一阶段中,所有的苹果酸均被分解。醋酸的形成主要在乳酸菌的平衡阶段。因此,有利于提高葡萄酒质量的苹果酸——乳酸发酵主要在乳酸菌的繁殖阶段中进行,并不导致挥发酸含量的提高。虽然苹果酸不是挥发酸形成的调节因子,但它的存在却表明不可能生成大量的挥发酸。