亦称游离细胞培养(free cell culfure)。是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养。从多细胞生物中得到单细胞的办法是,开始对切离的组织的初始培养物(Primary culture)进行振荡培养,然后在连续培养中用适当的筛孔将游离的细胞分筛出来,再将收集起来的游离的单细胞悬浮在液体培养基中,最后用微量吸管吸取一个细胞。动物细胞的单细胞培养时,要适当稀释接种,为使得到的单细胞进行增殖,可以采用微量培养法和保护培养法,对浮游的单细胞群进行平面培养。单细胞培养物的目的,在于可以得到来自单个细胞的细胞群的无性繁殖系(clone)(无性繁殖系化)。