聚丙烯酰胺凝胶电泳适宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分 析.其装载的样品量大,回收DNA纯度高.长度仅相差0.2%(即500bp中的1bp)的核苷酸 分子即能分离.
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体,在催化剂TEMED(N,N,N,N'一四甲基乙二胺)和 过硫酸铵的作用下,丙烯酰胺聚合形成长链,聚丙烯酰胺链在交联剂,N,N'一亚甲 双丙烯酰胺参与下,聚丙烯胺链与链之间交叉联接而形成凝胶.
聚丙烯酰胺凝胶孔径的大小是由丙烯酰胺的浓度决定的。聚丙烯酰胺凝胶电泳的材料有:
1.电泳仪器:电泳仪,垂直电泳槽及其附件.
2.30%丙烯酰胺
丙烯酰胺,29克
N,N'一亚甲基双丙烯酰胺,1克
H2O,加至100ml
装于棕色瓶内,4℃可保存二个月.
3.10%过硫酸铵
过硫酰铵,1克
加水至,10ml
4℃可保存一周,-20℃可保存一个月.
4.1XTBE电泳缓冲液
5.TEMED(四甲基乙烯基二胺)