基因芯片样品制备

一般说来应用DNA芯片进行实验包括5个过程：生物学问题的提出和芯片设计；样品制备；生物杂交反应；结果探测；数据处理和建模。

1．样品制备。一般所需mRNA的量是以一张表达谱芯片需要3μg mRNA计算的

不同组织抽提3－10μg mRNA所需组织量

考虑到个体差异以及样品在研磨、匀浆等过程中的损失，客户提供的样品量应在上述基础上增加1-2倍。

2 样本采集过程关键点．

组织标本采集操作建议规程,(取标本所需关键器材和处理要求 )

注：
· 以下步骤1 － 5应在冰上进行且不超过15分钟，超过时间会导致样品的RNA降解。
· 对肿瘤组织的取材，要求尽可能准确地判定肿瘤和正常组织，例如对于手术切除的整个或部分前列腺，可能要根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。

1 离体新鲜组织，切成多个1cm3小块，剔除结缔组织和脂肪组织。胃、肠组织应剪除外膜；肝、肾、脾应剪除门部血管神经，肿瘤组织应将周围的正常组织切除干净（正常组织也应将周围的肿瘤组织切除干净）。

2在RNase-Free 0.9％生理盐水中漂洗样品，以去除血渍和污物。

3 用铝箔包裹组织，或用5ml冻存管装载组织(但最好统一采用铝箔)。用记号笔在铝箔或冻存管外表写明样品编号，并贴上标签，迅速投入液氮冷却。

4 填写样品登记表，写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等

将液氮冷却的组织放入样品袋（每个样品袋只保存同样的组织），袋口留一根编号绳，绳上粘一张标签纸（标签上注明：样品名称、编号、日期），迅速转入便携式液氮罐

5 保留1-2张取材部位的病理切片。