最常用的检验乙型肝炎病原体的试验。以前又称澳大利亚抗原或肝炎协同抗原。乙型肝炎病毒是DNA病毒。在乙肝病人血清中可发现3种形态不同的病毒颗粒。即大球形颗粒(Dane颗粒)、小球形及管状颗粒。前者为完整的乙肝病毒颗粒,含有病毒的表面抗原(HBsAg)、核心抗原、e抗原及DNA 多聚酶等;后两者的主要成分为HBsAg。HBsAg是一种含糖的脂蛋白,由6种多肽组成。有共同的抗原决定簇“a”和几种亚型抗原决定簇d、y、w、r,按不同组合构成多种亚型。我国以adr型为多见。HBsAg有免疫原性,能刺激机体产生抗体,起抵抗乙肝病毒的作用。HBsAg是乙型肝炎的一个重要诊断指标,多数急性乙型肝炎病人在疾病的潜伏期即可检出HBsAg,在急性期达高峰,以后迅速下降。慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎、肝炎后肝硬化、原发性肝癌等,也可检出HBsAg。HBsAg携带者的血清中HBsAg阳性结果持续时间可能很长,但并不表现出疾病。HBsAg的检查方法很多,有琼脂免疫扩散法、对流电泳法、反向被动血凝法(RPHA)、酶联免疫法、固相放射免疫法等。但前二者灵敏度不够,已很少用。RPHA法操作简单快速,不需特殊仪器,灵敏度高于前二者,为目前应用较多之方法,但其灵敏度与特异性仍不如酶联免疫法,故将会被酶联免疫法所取代。放射免疫法虽然灵敏、特异,但须同位素标记,试剂来源不足,不宜推广。肝炎病毒对干燥与紫外线耐力强。可用高压灭菌法或过氧乙酸浸泡等方法消毒。