首先,我们先了解一下什么是培养皿。
那么,培养皿接种后为什么要倒置培养呢?
主要原因有以下几点:
当我们刚刚倒完平板,并盖上培养皿盖后,培养基尚有余温且刚凝固不久,此时的水分较大,湿度也相对较高。在皿盖上,你会发现凝结了一些水珠。如果平板正放,这些冷凝的水滴会流到培养基里,不仅容易造成污染,还可能使培养基与培养皿之间出现分离,导致平板在移动时容易滑动。此外,若培养基中的水分较大,在接种培养时,菌种会四处流动,使得长成的菌膜连在一起,给后续的计数工作带来困难。
培养条件为必须通风时,倒置的平板可以减少培养基表面的空气流动,减慢培养基中水分蒸发的速度,保持琼脂等固体培养基中的水分,充分的维持琼脂等凝固剂的弹性,延长培养基出现干裂的时间。所以,倒置培养有利于菌种的繁殖和生存。如果将平板正放,大概几天时间培养基就会出现水分散失和开裂的情况。可见,防止培养过程中水分散失是非常重要的。
倒置平板在拿取时能够保持原状,不易出现平板底部与盖子分离的情况,从而避免环境中的杂菌污染。同时,倒置培养使得培养基表面的菌落相对不会太快扩散,便于观察和计数菌落特征。倒置平板使得观察者可以从培养皿的底部观察菌落,这有助于更清晰地观察菌落的形态、大小和颜色等特征。
倒置平板有助于保持培养条件的一致性,因为所有平板都处于相同的环境条件下,有助于实验结果的可重复性。
倒置培养时,由于平板内的空气不易流动,能尽可能的减少外来杂菌的侵染,避免杂菌污染培养基和培养物。通过实验观察,发现如果平板正放,平板的周边容易长出杂菌菌落。
在培养过程中,我们可能需要多次打开培养箱取放平板。如果平板正放,不小心容易将皿盖掀开,增加污染的风险。而倒置的平板在拿取时能够保持原状,不易出现皿底和皿盖分离的情况,从而避免环境中杂菌的污染。
那么如何正确的倒置培养皿呢?
现在总结几点小技巧供大家参考:
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使用已消毒的平板,并在无菌条件下操作。
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佩戴干净的无菌手套,以防止细菌和其他微生物的污染。
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倒置平板时,应将平板的盖子倒置放置,以便让盖子在下、平板底在上。这样可以防止平板盖上的水分滴到培养基上造成污染。
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放置平板时要小心,避免颠簸和震动。
1.扩大培养,一般用液体培养基,不能倒置。
2.其实还有一些平板培养的情况是可以不用倒置的,比如在琼脂平板上进行扩大培养,是用已经纯化的单一菌种,接种比较大的量(比正常计数量要大,通常100毫米平板接种0.5毫升)到平板上,通过培养让菌长满整个平板,再加点无菌水用L形涂板器把菌刮下来。有些特定研究会用这种扩大培养的方法(而不是液体培养基培养后离心),这种培养理论上来说平板可以不用倒置,因为不存在冷凝水滴落造成菌种污染的问题(毕竟用的已经是纯化菌种了)。