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HPLC分析仪器的普及和其在自动化程度的提高，自动进样模式取代了原来手动模式，它大大提高了工作效率，增强了分析的精度，消除了人为误差等等优势，越来越多的单位使用自动进样器。与此同时，自动进样器有时出现的故障往往会使人头疼。要弄清楚故障发生的原因，有效地解决它的故障，首先要从日常维护和保养着手。
自动进样器常规维护
1.及时清洗色谱系统平时分析好样品，清洗好色谱柱后，用一根PEEK管连接在原先接色谱柱位置，用脱气的纯水以1.5mL/min流速清洗1.5小时，后用甲醇用同样条件清洗。自动进样器清洗液换上甲醇，打开排液阀，用针筒抽吸越50mL，再关闭排液阀，purge，rinse各三次，结束后按shift，9，关闭自动进样器。纯水清洗色谱系统能清除管路中残存的缓冲盐，甲醇清洗，防止系统滋生细菌和微生物堵塞管路，也可以洗去不溶于水的物质。2. 定期更换Septum cutout定期更换Septum cutout，即Rinse口帽中的橡皮垫，分析样品设置自动进样中有洗针的程序，所以一段时间后橡皮垫很容易脏。及时更换避免垫上脏物污染针头。3.定期更换进样隔垫定期更换进样隔垫。用固定扳手把进样口帽卸下，把里面的进样口衬筒sleeve取出，取下旧的进样垫，把新的原样装入，并原样装在进样口，用手把螺母拧紧，用扳手再拧约15°。4.定期涂抹润滑油用吸水纸插干净控制进样针的升降轴上的油污和垃圾，用少量润滑油涂于升降轴上，涂好之后用吸水纸吸去多余的润滑油。测试几个样品，听升降轴工作时声音清脆和声音有规律为佳。5.纯甲醇清洗长期不用机器长期不用机器可以用纯甲醇代替清洗液，针筒抽吸约100mL清洗液，后purge 和rinse几次。注：Rinse口螺帽和进样口衬筒及进样口螺帽若有盐析或附脏物，先用纯水，后异丙醇或甲醇放超声波超洗10分钟。洗去脏物后晾干装上。6.及时更换计量泵密封垫圈及时更换计量泵密封垫圈：更换这个位置的密封垫圈时要注意，与泵不同的是，使用者先要进入仪器的诊断维护界面，把计量泵内的柱塞杆收回去再拆卸计量泵，否则拆下来的时候柱塞杆处于受压缩的位置，安装的时候就麻烦了。计量泵的使用频率非常的低，几乎可以低到忽略不计，但是这个密封垫圈一样会有磨损，使用三五年的仪器有时会发现这个位置漏液，但是这种问题发生的频率非常低。7.通阀维护进样速度要快。注射器进样时必须采用平头针。使用部分装液法进样时，进样量多为定量管体积的75%，如果25μL的定量管多进样15μL，并且要求每次进样体积准确、相同；一般情况下不要轻易拆卸阀体，如果孔已经阻塞或需要更换磨损部件是才能才开阀。样品溶液均要用0.45μm的过滤器过滤，防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。经常清洗进样阀，气相色谱仪长时间不使用或环境温度较高时，导致阀内残存的淋洗液中的溶液挥发，盐浓度增加形成结晶析出。当然在日常工作中必然会出现一些故障，这些故障一开始会使我们束手无策。但是当我们冷静下来，一点点排查原因，会发现其实有些问题很容易解决。以下是小编收集的一些易发生的问题和解决方法，这里写出来与大家共同探讨。
自动进样器常见的故障和解决办法
1.基线不稳，鬼峰增多现象：Fig1 a 和Fig1 b分析的是同一标准品。Fig1 a基线不稳，鬼峰增多;而Fig1 b基线稳定，为正常图谱。Fig1 a是基线不稳，鬼峰增多的图谱Fig1 b是正常的图谱，同时是清洗干净后的图谱原因：在排除了泵，流动相和检测器问题后，这种现象说明进样系统被污染了。解决方法：用5%的高氯酸水溶液代替原来的自动进样器的清洗液，用针筒抽吸约100mL，在样品瓶中装入上述清洗液，用一根塑料阻尼管代替色谱柱，阻尼管出口处连废液，不接检测器。打开泵，设置一个常规流速。设置自动进样程序，进样量200μL，分析时间1分钟，连续20次。结束后把清洗液换成纯水，样品瓶中装纯水，依上述同样操作，(考虑到进样量较多，且重复次数多，准备5个装适量液体的样品瓶，放入样品盘中，设置自动进样程序，每个瓶连续抽4次，5个样品瓶合计抽20次，避免吸空)。说明：5%的高氯酸水溶液能够有效地去除系统中的污垢，如若无高氯酸，可用甲醇，纯水大进样量多次清洗，也能起到同样的效果。2.泵压力突然降至0或很小现象：在一次连续分析样品过程中，开始分析时系统很正常，但是到分析第八个样品时突然发现泵压降至0.3Mpa，而正常时泵压为5.5Mpa。闻到进样器中有甲醇味(流动相中甲醇含量很大)。打开进样器门，发现排液阀下面的管子有液体滴出，带有甲醇味，停止系统，按shift+9发现进样口和rinse口盐析很厉害。原因：进样口被堵，流动相无法进入色谱柱，渗漏出来，致使泵压下降。解决方法：根据自动进样器常规维护3.和4.操作，更换进样隔垫和Septumcutout(若没有备件，进样口密封圈和rinse口隔垫用纯水→甲醇超洗干净。)用擦镜纸沾纯水擦干净进样口和rinse口旁的盐析，再用甲醇擦洗。装上两个部件，打开机器调试，无渗漏，泵压正常即可。3. 进样重现性不佳原因：1)计量泵不准;2)六位阀磨损。解决方法：1)计量泵吸液准确性判断。在样品瓶中装入足量的纯水，擦干净外面的水分，用分析天平称量，记录读数W1，放入进样盘，设置进样程序，进样量100μL，连续十次，结束后滤纸擦干样品瓶表面的水分，置天平称量，得读数W2，W1-W2得的数值应为1mL纯水在相应温度的质量。若差别不大，则计量泵无碍。若计量泵有问题，有可能计量泵柱塞杆或密封圈有问题。2)六位阀磨损。根据自动进样器说明书，拆下六位阀，观察是否三个口有磨损，若磨损严重，则更换新的六位阀，根据书上的操作，装配好，调试，重现性良好即可。4.针座堵塞针座堵塞的问题相信很多人都遇到过，有时候不小心错用了硬质塑料小瓶盖或者是瓶盖上的进样垫重复使用很多次，进样针针头扎下去的时候，会把瓶盖或瓶垫的碎屑吸到针孔里去，针头落到针座上去以后，流动相经过100ul定量环流经针座，碎屑被带到针座入口，造成针座堵塞、系统压力过高或者针座漏液。超净工作台发现问题以后，进入仪器诊断界面，把针头提起来，离开针座，去掉自动进样器模块的前盖，拆掉针座连接六通阀的螺钉，用力把针座取下，将针座倒接到液相泵上，流速设置为5ml/min加压，一般的堵塞物都能立刻就给冲洗下来，如果冲不下来可以将针座放到超声仪里超声，然后再接泵冲，或者干脆延长管路，边接泵冲边超声，有一次我甚至是边用泵冲边超声边用气相手动进样针的针芯去捅那个针座入口才最终把里边的堵塞物给弄出来，然后装回去就一切OK了。5.机械故障自动进样器的机械手臂上的问题，仔细观察进样器机械手臂工作时的运动，主要包括横向和纵向，这些运动都依靠皮带、齿轮和丝杠来完成。自动进样器机械故障主要由空气中的灰尘引起，空气中的灰尘吸附在皮带、丝杠和齿轮上，增大了摩擦，严重时直接导致预定的动作不能完成，甚至仪器开机时自动进样器自检都不能通过，出现这种问题可以把仪器关掉，用干净的不掉纤维的无纺布去擦拭丝杠、皮带和齿轮等传动装置，擦不到的地方可以用手拉动皮带，然后再擦，有经验的可以把仪器外壳拆开来擦拭。注意：千万不要往丝杠上随意抹润滑油，因为润滑油本身会加重灰尘的吸附。擦完以后重启仪器试一下，很多时候问题都能解决。至于更复杂的机械臂定位不准或者无法抓取小瓶等问题，最好由专门的工程师上门来做维修了。对于自动进样器的维护保养和故障排除是一次次经验的积累。高效液相色谱的各个组件是互相联系的，如果一个部件有问题或被污染，被堵塞，可能会影响后面的部件，同时也要检查前面的部件是否有问题。比如基线不稳，要检查检测器是否被污染，检查流动相有没有问题，进样器是否脏了，色谱柱是否被污染，色谱柱是否没有稳定好，环境温度是否稳定等等。所以有时查问题比机器维修更难。这就要我们在工作中多多积累经验，多观察，多动脑筋。这才能熟悉您的机器，更好地用好机器。
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