蛋白浓度测定的方法有很多,但每种方法都有其特点和局限性,因而需要在了解各种方法的基础上根据不同情况选用恰当的方法,以满足不同的要求。例如凯氏定氮法结果精确,但操作复杂,用于大批量样品的测试则不太合适;Lowry法精确度较高,但是比较费时,且每步的时间要求相对严格;Bradford法灵敏简便,但易受去垢剂的影响;BCA法以其试剂稳定,抗干扰能力强,结果稳定,灵敏度高而受欢迎。
5. UV吸收法:
原理:利用蛋白质中的芳香族氨基酸(如酪氨酸、色氨酸)在280nm处的吸收峰,测定溶液中蛋白质的含量。
优点:操作简单,无需添加试剂;可同时测定多个样品。
缺点:灵敏度较低,只能检测高浓度的蛋白质;对于某些蛋白质(如酶)会产生干扰,导致测定结果不准确。