一、冻存管的选择

‌1、材质‌：冻存管一般是由无细胞毒性的塑料材质制成，常见的材质包括PP（聚丙烯）、PE（聚乙烯）和PETE（聚偏氟乙烯）。其中，PP材质因其出色的耐化学性和温度稳定性，特别是能在液氮环境下（-196℃）保持稳定，成为实验室的首选。

‌2、规格‌：冻存管一般有0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml等规格，具体选择要根据冻存样品量的大小来确定。一般来说，2.0ml冻存管被广泛使用，但建议留出20%的空间以适应体积变化，避免过满或过空。

‌3、构成‌：冻存管一般由管盖加管体构成，有内旋盖和外旋盖之分。内旋盖一般用于液氮冻存生物样本，其管口的硅胶垫增强了冻存管的密封性，可以有效地防止液氮渗入；外旋盖则用于冰箱中冻存样本，便于标记和降低处理样品时的污染概率。

二、冻存管的使用

‌1、样本处理‌：从细菌纯培养物中挑取新鲜培养物配成适当的菌悬液，接种于菌种冻存管中。注意拧紧冻存管，来回颠倒几次使细菌乳化，但不能旋摇。

‌2、储存条件‌：使用冻存管储存样本时，应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存。避免将冻存管直接放到液相之中保存，因为液氮有一定几率会渗入冻存管内部，复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡，这样极易造成冻存管的炸裂，并具有生物危害性。

‌3、操作安全‌：操作冻存管复苏时，应全程使用安全防护设备，建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下，请佩戴护目镜或防护面罩。

三、注意事项

‌1、检查冻存管‌：在使用前，首先要检查冻存管是否洁净且没有任何破损，如有问题，应报废该冻存管。

‌2、样本量控制‌：冻存的样本量不要超过冻存管要求的最大工作体积，建议容量是最大工作体积的80%。例如2mL冻存管中液体体积应低于1.6mL。

‌3、检查密封性‌：在将冻存管放入液氮罐之前，请务必确认盖子已拧到位，感受有明显阻力即可，请勿施力过度。选用质量好且密闭性好的内旋冻存管，可以有效防止液氮渗入。

4、温度均匀‌：冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生，冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。

5、取出方式‌：从液氮罐取出后需尽快将冻存管水平放置或倒置于桌面数十秒，等液氮流出后再开启冻存管，以防止液氮迅速汽化膨胀导致压力升高而爆管。